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xuqingchun33银虫 (小有名气)
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[求助]
双酶切体系是什么意思
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各位大侠，请问一下下面的这个双酶切体系是什么意思？能否举个例子，谢谢 Double Digestion with BamHI, NdeI We recommend: Buffer 2X Tango? 2-fold excess of BamHI 2-fold excess of NdeI Incubate at 37°C |
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 【分子生物】EPI帖 |
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lxj341401
至尊木虫 (著名写手)
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【答案】应助回帖
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西瓜(金币+5, EPI+1): Good!讲得很清楚了！ 2011-07-02 16:48:36
xuqingchun33(金币+1): 2011-07-03 12:49:56
西瓜(金币+5, EPI+1): Good!讲得很清楚了！ 2011-07-02 16:48:36
xuqingchun33(金币+1): 2011-07-03 12:49:56
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一看就知道楼主用的是fermentas公司的限制性内切酶。 Double Digestion with BamHI, NdeI就是选择的酶是BamHI, NdeI。 We recommend: Buffer 2X Tango该公司推荐使用的酶切缓冲液是2X Tango，就是加酶切体系总体积的1/5的10X Tango。 2-fold excess of BamHI 2-fold excess of NdeI因为这两个酶在2X Tango条件下活性都只有50-100%，不是100%，为了保证切割效率，所以加入的酶量是2倍。 Incubate at 37°C 这个就是酶切温度了。 |
4楼2011-07-02 16:09:34