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苏拉的世界

金虫 (著名写手)


[交流] PCR鉴定与酶切鉴定

构建了一个表达载体,特别特别的闹心,以为弄好了呢,PCR鉴定的时候都会有目的条带,但是酶切的时候就没有了,呢呢呢。气死我了,是当它存在还是不存在,我要疯掉了
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苏拉的世界

金虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by 阿修罗Axuro at 2011-06-21 17:13:27:
是这样的,一般PCR鉴定的假阳性很高。
我一般就是只有样本数很多的时候才用菌液做PCR,初步鉴定,然后再阳性的里面提质粒,酶切鉴定。如果样本少,就直接提质粒,酶切鉴定。据我做PCR鉴定很多次得经验来看,PCR鉴 ...

嗯。。。谢谢您了。。。
9楼2011-06-22 09:04:27
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qjy_134

铜虫 (小有名气)



苏拉的世界(金币+1):谢谢参与
苏拉的世界(金币+1): 嗯,那你说是哪个的问题 2011-06-21 10:55:10
你鉴定的时候用载体上的引物
抽的质粒纯度要高
2楼2011-06-21 10:34:16
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lihuaannie

新虫 (初入文坛)



苏拉的世界(金币+1):谢谢参与
鉴定采用载体上面的引物,注意是否同尾酶连接,
3楼2011-06-21 13:26:03
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阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)



苏拉的世界(金币+1):谢谢参与
PCR只能初选,必须以酶切为准,酶切对了,然后送去测序。最后的测序结果才是可靠的。
4楼2011-06-21 14:28:41
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