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丫头7976

铜虫 (正式写手)


[交流] PET-28a C末端his标签

我想用PET-28a的 C末端his标签,不用N端的his标签,那么把我的目的片段插入到
NCOI和Hind III之间,这样就把N断的his-tag,T7-Tag切掉了,不知道这样会不会影响我的膜蛋白表达,请高手指点。谢谢
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丫头7976

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-06-17 10:58:56:
这样做不影响表达的,但前提是你的目标蛋白适合这个系统表达。

谢谢啊 这个得做一下才知道是不适合我的膜蛋白表达,再向你请教一个问题,载体中的T7-tag 或S-tag有什么作者用呢?
3楼2011-06-17 14:34:02
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★ ★ ★ ★
丫头7976(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-18 10:40:26
这样做不影响表达的,但前提是你的目标蛋白适合这个系统表达。
2楼2011-06-17 10:58:56
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丫头7976(金币+2): 哦 明白了 谢谢啊 2011-06-18 07:57:44
引用回帖:
Originally posted by 丫头7976 at 2011-06-17 14:34:02:
谢谢啊 这个得做一下才知道是不适合我的膜蛋白表达,再向你请教一个问题,载体中的T7-tag 或S-tag有什么作者用呢?

T7-tag 用来做western分子杂交的,相当于抗原,有专门的T7 tag标签抗体可以和它结合。
4楼2011-06-17 14:51:52
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★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-06-17 18:50:52
丫头7976(金币+1): S-tag是PET-30中的标签,估计和你说的T7-tag有类似的作用吧 2011-06-18 07:58:41
S-tag没听说过,His-tag是纯化标签,镍柱亲和层析。
5楼2011-06-17 14:54:40
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