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细菌16s pcr原液测序问题
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请教各位大虾~~~我用的引物是27f和1492r,p的是细菌的16s全长,然后原液测序,双向测通后拼接。测序公司每次都能测出的我1492r,每次都是告诉我27f测不通,每次都是测到500bp左右以后断掉,我看了峰图,1492r很稳定也很好,飘峰一般都是在800bp以后了,但是就是27f总是测不通,到500bp突然就杂峰很大很多然后就断掉。 pcr的条带也是很明亮没有杂带的,能是什么原因呢???已经测了很多样品了,大部分的27f都测不通,急切的求指教啊~~ |
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