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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR产物纯化与回收
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xwsooo

银虫 (小有名气)

[交流] PCR产物纯化与回收 已有8人参与

我查过我要做的内切酶活性受PCR反应体系影响比较大，现在打算做个纯化看看，不知道是把PCR产物直接用试剂盒纯化还是先电泳再切胶纯化，哪个回收效率高？（我的PCR产物电泳条带较亮，没杂带，二聚体较淡）
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1楼 2011-06-08 09:49:05
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cdl007

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
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西瓜(金币+3): good 2011-06-08 19:05:26
引用回帖:
Originally posted by xwsooo at 2011-06-08 09:49:05:
我查过我要做的内切酶活性受PCR反应体系影响比较大，现在打算做个纯化看看，不知道是把PCR产物直接用试剂盒纯化还是先电泳再切胶纯化，哪个回收效率高？（我的PCR产物电泳条带较亮，没杂带，二聚体较淡）

大家回答问题的时候看清提问者困惑的地方。

他说查过，内切酶活性受PCR反应体系影响大，需要纯化，不是说条带杂需要纯化。


完全直接试剂盒纯化。

试剂盒直接纯化是去除PCR反应体系里的盐离子，taq酶，dNTP，引物等，主要是去除掉盐离子Mg或K，
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10楼2011-06-08 17:15:42
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sfb1020

金虫 (小有名气)
★
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先电泳再切胶回收纯化。
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2楼2011-06-08 09:57:37
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
直接回收效率高。割胶回收收率肯定低些。
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仕不可不弘毅，任重而道远
3楼2011-06-08 10:23:11
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shine372

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
1949stone(金币+2): 同意 2011-06-08 16:12:47
割胶回收的会比较纯，而直接回收的还是会有杂
内切酶活性受PCR反应体系影响大的话，建议还是割胶回收吧
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4楼2011-06-08 10:29:49
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