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PCR产物纯化与回收
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xwsooo
银虫
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虫号: 1014771
注册: 2010-05-09
专业: 临床生物化学检验
[交流]
PCR产物纯化与回收
已有8人参与
我查过我要做的内切酶活性受PCR反应体系影响比较大,现在打算做个纯化看看,不知道是把PCR产物直接用试剂盒纯化还是先电泳再切胶纯化,哪个回收效率高?(我的PCR产物电泳条带较亮,没杂带,二聚体较淡)
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2011-06-08 09:49:05
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shine372
木虫
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性别:
MM
专业: 微生物学
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1949stone(金币+2): 同意 2011-06-08 16:12:47
割胶回收的会比较纯,而直接回收的还是会有杂
内切酶活性受PCR反应体系影响大的话,建议还是割胶回收吧
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4楼
2011-06-08 10:29:49
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sfb1020
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在线: 68小时
虫号: 466293
注册: 2007-11-23
性别: GG
专业: 保护生物学与恢复生态学
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先电泳再切胶回收纯化。
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2楼
2011-06-08 09:57:37
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虫号: 528502
注册: 2008-03-19
性别: GG
专业: 生物化学
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直接回收效率高。割胶回收收率肯定低些。
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仕不可不弘毅,任重而道远
3楼
2011-06-08 10:23:11
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1949stone(金币+2): 言之有理 2011-06-08 16:12:57
西瓜(金币+3, EPI+1): 有道理。我们也是,没有砸带就用直接用试剂盒或者乙醇沉淀纯化,有杂带就胶回收。 2011-06-08 18:45:49
你的电泳条带比较亮无杂带的话就可以直接纯化,不过纯化的时候体积要小一些,浓缩一下。。。
如果有杂带的话最好切胶纯化。。。
其实主要还是为了下游实验服务的。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
5楼
2011-06-08 10:42:16
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