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xwsooo

银虫 (小有名气)

[交流] PCR产物纯化与回收 已有8人参与

我查过我要做的内切酶活性受PCR反应体系影响比较大,现在打算做个纯化看看,不知道是把PCR产物直接用试剂盒纯化还是先电泳再切胶纯化,哪个回收效率高?(我的PCR产物电泳条带较亮,没杂带,二聚体较淡)
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+2): 言之有理 2011-06-08 16:12:57
西瓜(金币+3, EPI+1): 有道理。我们也是,没有砸带就用直接用试剂盒或者乙醇沉淀纯化,有杂带就胶回收。 2011-06-08 18:45:49
你的电泳条带比较亮无杂带的话就可以直接纯化,不过纯化的时候体积要小一些,浓缩一下。。。
如果有杂带的话最好切胶纯化。。。
其实主要还是为了下游实验服务的。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
5楼2011-06-08 10:42:16
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sfb1020

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
先电泳再切胶回收纯化。
2楼2011-06-08 09:57:37
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
直接回收效率高。割胶回收收率肯定低些。
仕不可不弘毅,任重而道远
3楼2011-06-08 10:23:11
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shine372

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
1949stone(金币+2): 同意 2011-06-08 16:12:47
割胶回收的会比较纯,而直接回收的还是会有杂
内切酶活性受PCR反应体系影响大的话,建议还是割胶回收吧
4楼2011-06-08 10:29:49
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