| 查看: 1361 | 回复: 5 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
PCR没有结果
|
|||
| 本人要做构建表达载体，可是目的条带p不出来，引物是根据NCBI上已经公布的序列设计的编码区，说明引物应该是没问题的；模板可以p出其它基因，唯独目的基因p不出来，温度梯度40-70℃都试过了，模板梯度也试过了，都出不来，只有一次在57℃时出来了非常淡的条带，50ul体系电泳就跟平时5ul电泳结果差不多，割胶回收之后连接没成功，之后再怎么也p不出来了。请高手指教！！！很急啊！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有106人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- pcr一直不出结果，可以从哪些方面调整
已经有13人回复
- 关于PCR无结果的原因
已经有20人回复
- 转基因检测结果不稳定，有时有，有时没有，求高人解释
已经有6人回复
- 求助！关于RT-PCR的问题！
已经有20人回复
- PCR 总是呈现涂抹状 求解答！
已经有39人回复
- 农杆菌菌液PCR没有结果
已经有10人回复
- 【求助/交流】PCR没有结果，希望高手指教
已经有29人回复
- 【求助/交流】基因克隆时，酶切有结果，PCR却P不出来
已经有11人回复
- 【求助/交流】菌落PCR问题
已经有23人回复
- 【求助/交流】大家觉得这个结果怎么解释？
已经有14人回复
- 【求助/交流】关于PCR的问题
已经有18人回复
- 【分享】PCR总是没有结果呢
已经有6人回复
- 【求助/交流】PCR同一体系、温度结果却不同
已经有18人回复
chachaxionga
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 729.3
- 散金: 90
- 帖子: 308
- 在线: 194小时
- 虫号: 1018929
- 注册: 2010-05-15
- 性别: MM
- 专业: 兽医寄生虫学
|
我也想问同样的问题，最近在做RT和gene walking，这个基因根据NCBI上的序列设计引物，RT扩增出来过一次，测序有突变，有多个终止子出现，因为后面要对蛋白表达进行亚细胞定位，所以要想再再，但是之后就再也没有扩出来过，换过最近推荐比较好用的酶，同时换过引物之后，RT扩出800多的片段，本来是应该2900多，还是往下游做了一下，测序跟公布的cDNA 比对，这个前后完全匹配，就是中间完全缺失了2000多，望高人指点。 基因组长距离扩增，想先拿到一部分序列，再做walking，一步一步拿到完整的基因组序列，长距离扩增时，拿到一部分序列，约3000bp，但是之后walking一直没有结果，只是在点样孔出有东西，刚开始怀疑模板量多了，之后减少了模板量，但还是没有结果 |
5楼2011-06-07 16:24:21
cdl007
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 41
- 应助: 46 (小学生)
- 贵宾: 0.025
- 金币: 2570.6
- 红花: 11
- 帖子: 545
- 在线: 123.1小时
- 虫号: 275133
- 注册: 2006-08-27
- 专业: 肿瘤病因
2楼2011-05-25 19:52:36
空谷幽风
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 32
- 应助: 13 (小学生)
- 贵宾: 0.05
- 金币: 1106.1
- 散金: 500
- 红花: 13
- 帖子: 615
- 在线: 116.5小时
- 虫号: 714271
- 注册: 2009-03-04
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2011-05-25 20:13:15
bbwalkman
木虫 (小有名气)
- MolEPI: 6
- 应助: 43 (小学生)
- 金币: 2334.5
- 红花: 3
- 帖子: 240
- 在线: 171.7小时
- 虫号: 1279904
- 注册: 2011-04-28
- 性别: GG
- 专业: 生化分析及生物传感
4楼2011-05-25 20:47:17
