| 查看: 3506 | 回复: 11 | |||
lzhaowin木虫 (小有名气)
|
[求助]
16S PCR扩增的问题
|
|
上周五做的16S PCR，扩增效果很好，而且做了连接和转化~ 周日发现Taq E结冰了，重新订了新的Taq E。 周二再重复做16S PCR的时候就发现没有目的条带，阳性对照条带很弱。怀疑是dNTPs快用完了，有可能降解了，所以换了新的dNTPs，结果电泳检测杯具的发现神马都没有！ 后来接着重新稀释100uM的引物母液至10uM，又换了实验室另一种Taq E同样是没有条带，阳性对照很弱。 怀疑是现在用的模板降解了？今天重复了上周五用的模板，结果还是悲催的没有任何条带？为什么呀？为什么？上周能做出来，这周就不行了！  望各路大侠赐教~ |
回复此楼» 猜你喜欢
面上合作单位盖章
已经有4人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有17人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有8人回复
-
导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！
已经有7人回复
-
青基如何破局
已经有7人回复
-
基金不中，共勉
已经有10人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有11人回复
-
基金未中，这种答复是模板吗？
已经有6人回复
-
看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉……
已经有6人回复
-
怎么看青基中了没有啊
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- DGGE引物，real-time PCR引物和 clone library引物 的转化问题
已经有8人回复
- 通用引物扩增细菌16S rDNA
已经有13人回复
- 土壤中含有农药，提取的土壤DNA进行PCR扩增，农药会抑制PCR反应吗
已经有5人回复
- 16S rDNA测序问题
已经有3人回复
- 16s r DNA扩增出来的片段都是1Kb左右，是不是有问题啊？求助
已经有7人回复
- 关于细菌RT-PCR的一些问题，希望同行探讨一下
已经有4人回复
- 【求助/交流】分子克隆后M13引物PCR扩增
已经有32人回复
- 【求助/交流】菌落PCR问题
已经有7人回复
zemin_fang
木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3643.4
- 红花: 4
- 帖子: 327
- 在线: 79.2小时
- 虫号: 465566
- 注册: 2007-11-22
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2011-04-28 16:57:22
wallace974
木虫 (小有名气)
- BioEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1656.4
- 散金: 162
- 帖子: 293
- 在线: 63.2小时
- 虫号: 459784
- 注册: 2007-11-15
- 性别: GG
- 专业: 生物海洋学与海洋生物资源
3楼2011-04-28 17:06:19
★ ★
amisking(金币+2): 鼓励分享经验。 2011-04-28 19:35:25
lzhaowin(金币+3): 谢谢你的经验~ 2011-04-28 21:42:10
amisking(金币+2): 鼓励分享经验。 2011-04-28 19:35:25
lzhaowin(金币+3): 谢谢你的经验~ 2011-04-28 21:42:10
|
本帖内容被屏蔽 |
4楼2011-04-28 17:34:47
rb
木虫 (著名写手)
小笨虫虫
- BioEPI: 3
- 应助: 44 (小学生)
- 贵宾: 0.1
- 金币: 4201.1
- 散金: 2346
- 红花: 9
- 帖子: 2363
- 在线: 287.7小时
- 虫号: 30311
- 注册: 2003-11-30
- 性别: GG
- 专业: 人类遗传学
5楼2011-04-28 23:44:35
6楼2011-04-29 00:07:17
xyj114114
木虫 (著名写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 4148.8
- 散金: 100
- 红花: 3
- 帖子: 1439
- 在线: 101.7小时
- 虫号: 1063812
- 注册: 2010-07-25
- 专业: 环境微生物学
7楼2011-04-29 00:30:27
8楼2011-04-29 13:48:46
9楼2011-04-30 08:51:28
10楼2011-04-30 09:41:10
投票:
10