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lzhaowin木虫 (小有名气)
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16S PCR扩增的问题
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上周五做的16S PCR，扩增效果很好，而且做了连接和转化~ 周日发现Taq E结冰了，重新订了新的Taq E。 周二再重复做16S PCR的时候就发现没有目的条带，阳性对照条带很弱。怀疑是dNTPs快用完了，有可能降解了，所以换了新的dNTPs，结果电泳检测杯具的发现神马都没有！ 后来接着重新稀释100uM的引物母液至10uM，又换了实验室另一种Taq E同样是没有条带，阳性对照很弱。 怀疑是现在用的模板降解了？今天重复了上周五用的模板，结果还是悲催的没有任何条带？为什么呀？为什么？上周能做出来，这周就不行了！  望各路大侠赐教~ |
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