| 查看: 2908 | 回复: 13 | |||
321wangke321金虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】求PCR条带微弱的原因和解决方法 已有9人参与
|
|
1、大家帮忙分析下原因，为什么这么淡? 2、看看怎样让条带更加亮些？25微升体系：17微升超纯水，2.5微升buffer，2微升dNTP，1微升上游引物，1微升下游引物，0.5微升Taq酶。引物浓度是10毫摩尔每微升。 3、能不能把条带切下来再P一次？  [ Last edited by 321wangke321 on 2011-3-25 at 19:08 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
281求调剂（0805）
已经有8人回复
-
环境领域全国重点实验室招收博士1-2名
已经有3人回复
-
材料专硕306英一数二
已经有10人回复
-
301求调剂
已经有6人回复
-
一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂
已经有7人回复
-
302求调剂
已经有6人回复
-
26博士申请
已经有3人回复
-
268求调剂
已经有3人回复
-
311求调剂
已经有10人回复
-
被我言中：新模板不强调格式了，假专家开始管格式了
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 基因组dna检测条带很亮 PCR扩增后条带非常弱 求助
已经有3人回复
- 相同条件的pcr产物，跑出不同的条带，是什么原因[/img][/img][/img]
已经有12人回复
- RT-PCR跑出来的条带没有量效关系怎么办？什么原因
已经有3人回复
- PCR目的条带没跑出，但是跑出了特异性很强的单一条带，是什么原因呢？
已经有9人回复
- 3‘RACE inner PCR 电泳结果总是有弥散现象回收条带不成带状什么原因啊？
已经有17人回复
- pcr目的条带弱，而dimer很亮，怎么调整呢？
已经有6人回复
- 【求助/交流】PCR后没有目的条带，有非特异性条带，求解决办法？？
已经有20人回复
- 【求助/交流】做培养细胞的RT-PCR，β-actin内参出现两个条带，求原因。
已经有10人回复
- 【求助/交流】PCR得到几条带，怎么办
已经有4人回复
- 【求助/交流】PCR扩增后没有条带是怎么回事?
已经有5人回复
- 【求助/交流】我想我是疯掉了，如此疯狂的PCR
已经有30人回复
- 【求助/交流】（5.20更新）PCR产物电泳没有条带，why?
已经有20人回复
阿修罗Axuro
金虫 (小有名气)
- BioEPI: 5
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1091.5
- 散金: 17
- 红花: 4
- 帖子: 210
- 在线: 107.9小时
- 虫号: 1097468
- 注册: 2010-09-13
- 专业: 药物分析
2楼2011-03-25 08:48:14
3楼2011-03-25 10:15:01
rioarsenal
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 675
- 帖子: 394
- 在线: 44.7小时
- 虫号: 1169059
- 注册: 2010-12-13
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
4楼2011-03-25 10:29:34
yabxxh
木虫 (正式写手)
- BioEPI: 11
- 应助: 22 (小学生)
- 贵宾: 0.005
- 金币: 2238
- 散金: 98
- 红花: 9
- 帖子: 465
- 在线: 88.6小时
- 虫号: 157001
- 注册: 2006-01-05
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2011-03-25 11:38:55
西瓜
荣誉版主 (知名作家)
- BioEPI: 8
- 应助: 94 (初中生)
- 贵宾: 3.157
- 金币: 1849.6
- 散金: 11458
- 红花: 116
- 沙发: 21
- 帖子: 7553
- 在线: 1449.5小时
- 虫号: 271749
- 注册: 2006-08-13
- 性别: GG
- 专业: 细胞衰老
- 管辖: 分子生物
6楼2011-03-25 12:16:13
321wangke321
金虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 343.4
- 散金: 216
- 红花: 7
- 帖子: 517
- 在线: 287.2小时
- 虫号: 1169264
- 注册: 2010-12-13
- 性别: GG
- 专业: 园艺作物采后生物学
7楼2011-03-25 19:08:41
321wangke321
金虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 343.4
- 散金: 216
- 红花: 7
- 帖子: 517
- 在线: 287.2小时
- 虫号: 1169264
- 注册: 2010-12-13
- 性别: GG
- 专业: 园艺作物采后生物学
8楼2011-03-25 19:09:07
321wangke321
金虫 (正式写手)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 343.4
- 散金: 216
- 红花: 7
- 帖子: 517
- 在线: 287.2小时
- 虫号: 1169264
- 注册: 2010-12-13
- 性别: GG
- 专业: 园艺作物采后生物学
9楼2011-03-25 19:10:08
阿修罗Axuro
金虫 (小有名气)
- BioEPI: 5
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1091.5
- 散金: 17
- 红花: 4
- 帖子: 210
- 在线: 107.9小时
- 虫号: 1097468
- 注册: 2010-09-13
- 专业: 药物分析
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+4): 鼓励交流 2011-03-25 23:01:16
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+4): 鼓励交流 2011-03-25 23:01:16
|
是蛮弱的，不知道楼主是用的什么模板，是质粒还是基因组DNA，不过我估计应该是基因组，质粒一般不会那么弱。可以试着考虑用扩增效率高的酶看，你是用的哪款酶？或者建议楼主模板和引物都加倍，酶的量可以少点，0.3或者0。2就够了，酶浓度高了的话甘油会影响活性的。一次P俩管，循环数可以适当的加5个。再试一试，如果还不好，就是可能引物太长了？模板质量不好？退火温度不适合？都有可能了。 不过楼主的带还是P出来了，应该没问题的，循环数适当放大。如果用的高保真酶的话，可以切下来做模板再P。 还有就是楼主的MARKER也不是很亮~是加少了还是曝光度不够？ [ Last edited by 阿修罗Axuro on 2011-3-25 at 22:32 ] |
10楼2011-03-25 22:29:51
5