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321wangke321

金虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】求PCR条带微弱的原因和解决方法已有9人参与

1、大家帮忙分析下原因，为什么这么淡?
2、看看怎样让条带更加亮些？25微升体系：17微升超纯水，2.5微升buffer，2微升dNTP，1微升上游引物，1微升下游引物，0.5微升Taq酶。引物浓度是10毫摩尔每微升。
3、能不能把条带切下来再P一次？

[ Last edited by 321wangke321 on 2011-3-25 at 19:08 ]

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王者风范，一切皆有可能。

1楼 2011-03-24 22:33:21

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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

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专业: 细胞衰老
管辖: 分子生物

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+2): 鼓励回答 2011-03-25 23:01:02

条带淡的原因不好说，可以试试把条带切下来再P。不过这种同一对引物再扩增产物的情况，很可能P不出来哦。如果你是拿来克隆的，不建议这样做。因为Taq酶保真性差，一次PCR就可能有错误，你拿PCR产物来再P，出错的概率就很高了。

赞一下(2人)

6楼2011-03-25 12:16:13

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