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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zplipeng

金虫 (著名写手)


[交流] 【求助/交流】有没有做过重叠PCR的(SOE-pcr)

各位有没有做过重叠PCR的,一般两端的重叠序列要多长bp才比较好呢?

另外,想在一个基因的一段加入一段序列,设计了68bp的长引物,一段与此基因有15bp重叠,成功的几率大不大呢?
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zplipeng(金币+2): 不过问公司的,他们说合成全基因时一般每段50bp左右。 2011-03-18 10:33:48
zplipeng(金币+1): 2011-04-26 08:07:53
不难,多挑几个单克隆去测序就是了。
合成基因,成百上千bp都是这么合出来的,几十个小意思
2楼2011-03-18 10:09:17
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jasco

木虫 (正式写手)


zplipeng(金币+2): 多谢。 2011-03-18 10:34:03
zplipeng(金币+2): 2011-04-26 08:07:49
15bp可以的,建议看看这段的tm,推荐>50℃
3楼2011-03-18 10:16:42
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zplipeng(金币+1): 好的,多谢啦。。。 2011-03-18 11:09:48
zplipeng(金币+2): 2011-04-26 08:07:43
呵呵,实验室有加100多bp的,都没有问题,但是长引物的话,质量很重要,找个好点的公司吧
4楼2011-03-18 10:52:37
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