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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有没有做过重叠PCR的（SOE-pcr）
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zplipeng

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】有没有做过重叠PCR的（SOE-pcr）

各位有没有做过重叠PCR的，一般两端的重叠序列要多长bp才比较好呢？

另外，想在一个基因的一段加入一段序列，设计了68bp的长引物，一段与此基因有15bp重叠，成功的几率大不大呢？
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1楼 2011-03-18 09:57:38
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roomofxw

木虫 (正式写手)
zplipeng(金币+1): 好的，多谢啦。。。 2011-03-18 11:09:48
zplipeng(金币+2): 2011-04-26 08:07:43
呵呵，实验室有加100多bp的，都没有问题，但是长引物的话，质量很重要，找个好点的公司吧
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4楼2011-03-18 10:52:37
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roomofxw

木虫 (正式写手)
zplipeng(金币+2): 不过问公司的，他们说合成全基因时一般每段50bp左右。 2011-03-18 10:33:48
zplipeng(金币+1): 2011-04-26 08:07:53
不难，多挑几个单克隆去测序就是了。
合成基因，成百上千bp都是这么合出来的，几十个小意思
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2楼2011-03-18 10:09:17
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jasco

木虫 (正式写手)
zplipeng(金币+2): 多谢。 2011-03-18 10:34:03
zplipeng(金币+2): 2011-04-26 08:07:49
15bp可以的，建议看看这段的tm，推荐＞50℃
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3楼2011-03-18 10:16:42
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