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wuzunfeng416

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】土壤真菌PCR 已有6人参与

最近再批土壤真菌,没条带,望大家提提建议,用的引物是NS1F和NS8R
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syw2005

铁杆木虫 (小有名气)

我用的ITS1和ITS4,第一次能扩出来,后来再也扩不出来,不知为何?试了好多条件都不行?难,我从模板、引物、酶都摸了,还是不行。不过有一些可以定下来,模板有抑制物。多试才有经验。
新疆胡杨
4楼2011-08-01 22:10:48
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allica

新虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
条带不好原因挺多的,首先检查你的基因组DNA质量。然后就是你的PCR模板量和PCR程序调整。可以做个退火温度梯度的实验。
2楼2011-03-15 15:41:56
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精精

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wuzunfeng416 at 2011-03-15 14:08:23:
最近再批土壤真菌,没条带,望大家提提建议,用的引物是NS1F和NS8R

用这对引物扩真菌好像问题是挺多的,但是好像好是能够扩出来的,再尝试试试~~
少才微善
3楼2011-03-17 16:49:24
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by syw2005 at 2011-08-01 22:10:48:
我用的ITS1和ITS4,第一次能扩出来,后来再也扩不出来,不知为何?试了好多条件都不行?难,我从模板、引物、酶都摸了,还是不行。不过有一些可以定下来,模板有抑制物。多试才有经验。

我觉得可能是模板的问题,如果模板有抑制物的话,可以稀释看看,祝好运!
5楼2011-08-02 09:12:31
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