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【求助/交流】大家酶切的体系都是什么样的呢?
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xiaoyu1014126
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[交流]
【求助/交流】大家酶切的体系都是什么样的呢?
每个实验室,甚至每个实验者都有自己的酶切体系,大家的酶切体系是什么样的呢?
多少体积?组成?818吧
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2011-03-01 16:17:18
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magy2006
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都这么有经验啊……呵呵
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6楼
2011-03-02 08:00:16
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brightfuture01
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★ ★
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-03-01 18:41:39
amisking(金币+2): 辛苦。 2011-03-01 19:34:51
我喜欢用30ul的体系
n ul PCR产物或者 DNA
1ul 酶I
1ul 酶II
3ul 10* buffer
ddH2O 补足
这个体积算是适中吧,做回收的话胶倒厚一点一个孔就装下了。
体系也不至于小到PCR产物或DAN中的杂七乱八的东西抑制酶切。
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2011-03-01 17:48:13
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wanghuiyanyx
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rainwander(金币+1): 鼓励参与交流~~~ 2011-03-01 22:39:33
xiaoyu1014126(金币+1): 2011-03-02 11:53:26
看你需要切什么东东啊,以及后续是干嘛用的,如果是验证质粒,20就够了,有时候用10微升的都没问题。但是要是切基因组的话,一般要用大体系(不少于50),而且基因组最好用黄枪尖(200微升)吸取。
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3楼
2011-03-01 21:40:24
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rainwander
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xiaoyu1014126(金币+1): 2011-03-02 11:53:47
20-100微升的酶切体系都做过,
酶的量0.5-2微升也试过
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4楼
2011-03-01 22:40:32
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