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【求助/交流】TAIL PCR第二轮在1kb以上弥散，怎么回事？
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TAIL PCR在第二轮在1kb以上弥散，怎么回事？ 宁外TAIL PCR的引物除了刘上要求的还有没有别的要求啊？ |
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zhouheyi_2(金币+1):谢谢参与
zhouheyi_2(金币+2): 2011-03-07 22:17:17
zhouheyi_2(金币+1):谢谢参与
zhouheyi_2(金币+2): 2011-03-07 22:17:17
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你是搞动物的还是植物的？ 把产物梯度稀释10倍和100倍，再用引物进行第三轮PCR扩增，第三轮的程序按照第二轮的程序进行。TAIL-PCR扩增的片段不会特别长，200-1000bp吧。 如果还是不行，可以更换引物，或者试试其他方法，前几天站内的朋友讲了一个新方法， .P. Acevedo, F. Reyes, L.P. Parra, O. Salazar, B.A. Andrews, J.A. Asenjo, Cloning of complete genes for novel hydrolytic enzymes from Antarctic sea water bacteria by use of an improved genome walking technique, Journal of Biotechnology 133 (2008) 277-286. 你可以试试，因为我现在没有做，所以如果你试了的话，也请你来分享一下经验。 |
3楼2011-01-21 11:32:24
2楼2011-01-21 00:09:10