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xnbioinfor

铜虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】琼脂糖电泳1×TAE配的不好 用什么后果

取了20ml 50×TAE, 定容到1000ml, 晃了几下,然后就用来制胶了,但是PCR电泳的结果不好, 条带很弱,而且上午跑出来的几条带,竟然没跑出来。现在怀疑1×TAE没混匀,这样会导致什么样的后果呢? TAE怎么配 才能让结果完美呢
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)


★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+1): marker 是个好东西 2011-01-18 15:34:10
对了,你的Marker怎么样?有条带吗?

如果Marker有条带的话,那就不是TAE跟胶的问题了,

如果Marker也没有条带,那就可能是TAE跟胶的问题。
9楼2011-01-18 15:10:04
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查看全部 12 个回答
★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-18 15:08:14
引用回帖:
Originally posted by xnbioinfor at 2011-01-18 10:17:58:
取了20ml 50×TAE, 定容到1000ml, 晃了几下,然后就用来制胶了,但是PCR电泳的结果不好, 条带很弱,而且上午跑出来的几条带,竟然没跑出来。现在怀疑1×TAE没混匀,这样会导致什么样的后果呢? TAE怎么配 才能让 ...

TAE没混匀,离子强度和pH就有问题,对电泳肯定有影响。
要让结果完美也不单单是TAE的问题了,各个步骤都要注意。
2楼2011-01-18 10:34:25
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feng__

金虫 (著名写手)


★ ★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-01-18 15:32:58
MAKER有问题么?

貌似也不至于跑不出来条带吧,不匀的话应该是条带不是直的,歪歪扭扭的那样吧 ,呵呵,么试过#17
3楼2011-01-18 10:35:50
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★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+1): 完全溶解很重要 2011-01-18 15:33:13
首先要确保缓冲液混匀了,然后溶胶也要完全溶解。
4楼2011-01-18 10:46:14
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