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forexchange

铁虫 (初入文坛)


[交流] 【求助/交流】琼脂糖电泳检测基因组DNA

各位大虾!想请教一个问题,我提的是真核动物基因组DNA,A260/A280在1.6左右,测得的DNA浓度也在100微克/毫升以上,可是跑0.8%的琼脂糖凝胶,就是跑不出带来呢?这是为什么?
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ycy1987

金虫 (正式写手)


缓冲液有问题吧!换个试试
2楼2011-04-03 20:15:55
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1949stone(金币+1): 鼓励 2011-04-03 21:11:55
是否除尽漂洗液中的乙醇,加样时漂样了?
3楼2011-04-03 20:29:41
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★ ★
dhd997(金币+2): 有可能哦 2011-04-07 08:08:03
难道忘了加EB了,或是楼主用的旧胶!
4楼2011-04-06 21:28:10
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xwsooo

银虫 (小有名气)


胶的浓度太小了把,可能DNA跑掉了。我第一次跑时用的是1%跑过了,后来换了 1.5%就好了
5楼2011-04-07 08:47:07
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szylnl

银虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by xwsooo at 2011-04-07 08:47:07:
胶的浓度太小了把,可能DNA跑掉了。我第一次跑时用的是1%跑过了,后来换了 1.5%就好了

真核基因组,多大啊!怎么可能跑走了!!!
6楼2011-04-07 10:42:02
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szylnl

银虫 (小有名气)


是不是忘了加EB了,或者是加了DNase
7楼2011-04-07 10:42:47
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点样点了多少?
8楼2011-04-07 11:45:07
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基因组电泳不是得用PFGE么?
9楼2011-04-08 08:01:10
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yhy322

铁虫 (初入文坛)


看看电泳缓冲液的浓度是不是与配胶浓度一致0.5xTBE,不一致肯定跑不出来。
10楼2011-04-08 09:42:06
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yhy322

铁虫 (初入文坛)


记着加EB啊
11楼2011-04-08 09:51:36
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Starring

新虫 (初入文坛)


forexchange(金币+1): 不能排除这种可能 2011-04-15 18:03:06
你那是纯化后的浓度吗?有可能你测出来的是含有杂质的DNA总浓度。
12楼2011-04-08 10:35:07
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forexchange

铁虫 (初入文坛)


谢谢各位!

我电泳缓冲液用的是1×TAE,点样量为2µL和4µL都不行。
EB加了,没有加DNase。只是用酚、氯仿粗提的,没有纯化。
13楼2011-04-13 15:44:57
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