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forexchange

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】琼脂糖电泳检测基因组DNA

各位大虾！想请教一个问题，我提的是真核动物基因组DNA，A260/A280在1.6左右，测得的DNA浓度也在100微克/毫升以上，可是跑0.8%的琼脂糖凝胶，就是跑不出带来呢？这是为什么？
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1楼 2011-04-03 19:06:17
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ycy1987

金虫 (正式写手)
缓冲液有问题吧！换个试试
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2楼2011-04-03 20:15:55
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
1949stone(金币+1): 鼓励 2011-04-03 21:11:55
是否除尽漂洗液中的乙醇，加样时漂样了？
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3楼2011-04-03 20:29:41
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
dhd997(金币+2): 有可能哦 2011-04-07 08:08:03
难道忘了加EB了，或是楼主用的旧胶！
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4楼2011-04-06 21:28:10
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xwsooo

银虫 (小有名气)
胶的浓度太小了把，可能DNA跑掉了。我第一次跑时用的是1%跑过了，后来换了 1.5%就好了
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5楼2011-04-07 08:47:07
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szylnl

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xwsooo at 2011-04-07 08:47:07:
胶的浓度太小了把，可能DNA跑掉了。我第一次跑时用的是1%跑过了，后来换了 1.5%就好了

真核基因组，多大啊！怎么可能跑走了！！！
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6楼2011-04-07 10:42:02
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szylnl

银虫 (小有名气)
是不是忘了加EB了，或者是加了DNase
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7楼2011-04-07 10:42:47
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天使托

专家顾问 (职业作家)
点样点了多少？
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8楼2011-04-07 11:45:07
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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)
基因组电泳不是得用PFGE么？
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9楼2011-04-08 08:01:10
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yhy322

铁虫 (初入文坛)
看看电泳缓冲液的浓度是不是与配胶浓度一致0.5xTBE,不一致肯定跑不出来。
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10楼2011-04-08 09:42:06
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yhy322

铁虫 (初入文坛)
记着加EB啊
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11楼2011-04-08 09:51:36
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Starring

新虫 (初入文坛)
forexchange(金币+1): 不能排除这种可能 2011-04-15 18:03:06
你那是纯化后的浓度吗？有可能你测出来的是含有杂质的DNA总浓度。
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12楼2011-04-08 10:35:07
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forexchange

铁虫 (初入文坛)

谢谢各位！

我电泳缓冲液用的是1×TAE，点样量为2µL和4µL都不行。
EB加了，没有加DNase。只是用酚、氯仿粗提的，没有纯化。
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13楼2011-04-13 15:44:57
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