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luzeyan

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】第一次pcr有目的条带,后来就做不出来了这是为什么呢?

自己设的引物,第一次pcr有目的带(较弱一点),再后来就p不出来了,这问题出在哪儿呢?
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QIAO4984

铜虫 (小有名气)


★ ★
luzeyan(金币+1): 谢谢 2011-01-18 08:15:47
dhd997(金币+2): 感谢交流 2011-01-18 09:00:24
你CDNA质量不好   

如果RNA片段丢失了一部分     反转录的CDNA永远不全

当然也扩不出


重新反转录
6楼2011-01-17 23:38:52
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模板分装了么?TE溶解的??冻融过几次??
2楼2011-01-17 20:29:40
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luzeyan

金虫 (小有名气)


TE是什么?

引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-01-17 20:29:40:
模板分装了么?TE溶解的??冻融过几次??

模板是cDNA,逆转录试剂盒合成的,约20ul每一小管,冻融多次直到这一管用完为止。TE是什么?用双蒸水溶解的
3楼2011-01-17 20:37:59
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★ ★
luzeyan(金币+1): 谢谢你 2011-01-18 08:14:38
dhd997(金币+2): good 2011-01-18 09:00:07
哦,冻融多次。。。。。。还有备用的没有冻融过的么。。
4楼2011-01-17 20:50:57
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