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luzeyan

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】第一次pcr有目的条带，后来就做不出来了这是为什么呢？

自己设的引物,第一次pcr有目的带（较弱一点），再后来就p不出来了，这问题出在哪儿呢？
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1楼 2011-01-17 20:25:38
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QIAO4984

铜虫 (小有名气)
★ ★
luzeyan(金币+1): 谢谢 2011-01-18 08:15:47
dhd997(金币+2): 感谢交流 2011-01-18 09:00:24
你CDNA质量不好   

如果RNA片段丢失了一部分     反转录的CDNA永远不全

当然也扩不出


重新反转录
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6楼2011-01-17 23:38:52
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
模板分装了么？TE溶解的？？冻融过几次？？
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2楼2011-01-17 20:29:40
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luzeyan

金虫 (小有名气)

TE是什么？

引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-01-17 20:29:40:
模板分装了么？TE溶解的？？冻融过几次？？

模板是cDNA，逆转录试剂盒合成的，约20ul每一小管，冻融多次直到这一管用完为止。TE是什么？用双蒸水溶解的
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3楼2011-01-17 20:37:59
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★ ★
luzeyan(金币+1): 谢谢你 2011-01-18 08:14:38
dhd997(金币+2): good 2011-01-18 09:00:07
哦，冻融多次。。。。。。还有备用的没有冻融过的么。。
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4楼2011-01-17 20:50:57
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