24小时热门版块排行榜    

查看: 1079  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

nestzhao

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助几个问题

各位,最近做双酶切,有几个问题,向大家请教一下
1、提取质粒时,一般说的“培养过夜”,这是一个什么概念,一般应该培养多少小时为宜?
2、在一般的内切酶说明书中,一般都说质粒含量≤1μg,这个1μg是个什么概念,该怎么控制这个含量?
3、提完质粒后,跑琼脂糖凝胶电泳,条带不是很亮,而且同时提几管质粒,有几管有条带,比较亮,有几管却没有或暗很多,不知道是什么原因。质粒时用试剂盒提的,操作都是同样的,而且已经不是一次出现这种情况了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

给力2011
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fzfangtao

木虫 (正式写手)

nestzhao(金币+1): 2010-11-01 18:21:04
12-14小时;能切开就行,一般买来的酶浓度很大的;可能性很多
3楼2010-11-01 16:55:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

amilie030312

金虫 (正式写手)


dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-11-01 10:16:18
nestzhao(金币+1): 2010-11-01 18:20:58
一般过夜培养的概念是12个小时左右,短的8小时就足够了,不好的要16个小时,这个要看张得颜色,我觉得是凭经验来的
我觉得如果是酶切就检验一下那也无所谓上样量小于多少了,能切开就行,如果是下游实验要求必须全部且完全,那可以延长酶切时间,不过有些酶延长时间容易产生星号活性,所以能延长时间的酶就可以用延长时间来使酶切彻底。
至于你第三个问题俺就不知道是啥情况了。
2楼2010-11-01 09:48:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tian1203

银虫 (著名写手)

nestzhao(金币+1): 2010-11-01 23:01:32
遇到了和你一样的问题:dnd:打算买快速酶试试
别紧张,我不是什么好人...
4楼2010-11-01 18:52:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyy2005bne

新虫 (小有名气)


dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-11-03 20:04:37
nestzhao(金币+1): 2010-11-03 22:09:06
1、培养过夜一般是12个小时,也分菌吧,大肠一般8h就可以了,谷氨酸棒杆菌说的过夜培养一般为16h,你也可以根据菌浓来决定具体时间。
2、我知道有质粒定量的,者应该是个浓度单位,具体的也不太明白。
3、不知道你们实验室的其他同学也出现过你这种情况吗,如果有的话,可能就是试剂盒的问题吧
5楼2010-11-03 20:01:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见