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【求助/交流】质粒的几个问题,诱变及表达的选择已有2人参与
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最近做实验,PCR产物连接到质粒上做随机诱变,选择的是pWSK29,是个低拷贝质粒 蛋白表达,选择的是pET21a(+),宿主菌为MG1655 我想问一下,为什么做随机诱变选择pWSK29? 蛋白表达,为什么用pET21a(+)?听人说好像MG1655不能用常用的表达载体,原理是什么? 另外,想问一下,复制子和启动子强度如何看呢?还是常用的那几个?比如pET21a就是T7启动子,它的强度是怎么样的? 还有,pWSK29上有个M13 primer,我想问一下,这个是什么意思? 先谢谢大家帮忙 |
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