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带刀猎人

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】菌落PCR为什么每次都扩不出来呢? 已有9人参与

我做菌落PCR,可是每次都P不出来。是因为革兰氏阳性菌菌壁较厚导致的菌体不能裂解吗?所以体系中模板量不足?
我用1%的TRITON- X100裂解后,先对裂解上清跑了一下电泳,结果是菌体能成功裂解,但是基因组DNA不能在胶里泳动,电泳40分钟后大部分DNA都还是在点样孔里。甚至有部分向阴极泳动。
这样的模板能直接加入PCR体系扩增吗?会不会导致扩增产物也是不能在胶里泳动?
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xiezhenrong

金虫 (正式写手)

北斗星


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你所用的PCR试剂有无问题?新划板革兰氏阴性菌一般PCR是可以P出条带的,不过挑菌体挑多了也会P不出来!
海阔凭鱼跃,天高任鸟飞!
7楼2010-10-15 12:40:43
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