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m200770154

木虫 (正式写手)

专注于ADC药物研究开发

[交流] 【求助/交流】如何沉淀RNA片段 已有5人参与

如何沉淀RNA片段?沉淀RNA片段工艺是?异丙醇沉淀工艺是?加入什么盐、多大量可以沉淀更好?谢谢大家了,我不是生物的,只好求助生物的专家了。呵呵。。。
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loveADC
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liyong1981

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1/4V异丙醇。盐嘛。NACL即可
2楼2010-09-16 11:01:39
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sfxt001

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1比1体积比加异丙醇,无需加盐即可沉淀RNA
3楼2010-09-16 11:03:20
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
给你个标准的
首先需加入0.1倍体积的ph5.2的3M 醋酸钠,混匀后加入
0.6-1倍体积的异丙醇,或2-3倍体积的无水乙醇

混匀后常温放置30min即可,若加乙醇的话也可以-20

不过低温容易把里边的盐一起沉淀下来

最后高速离心,得到沉淀既是

沉淀用70%的乙醇漂洗一下再离心,晾干即可

RNA含量一般较低,所以离心的时候你还得注意离心管的放置要有规律,因为有可能你的沉淀肉眼看不到
4楼2010-09-16 12:06:33
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jasco

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我喜欢添加一点糖原,特别是对microrna
5楼2010-09-16 15:32:21
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momejie

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by jasco at 2010-09-16 15:32:21
我喜欢添加一点糖原,特别是对microrna

能详细说明一下沉淀microRNA的过程中加入糖原的量,原理及优缺点么?
6楼2014-03-28 10:53:00
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