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【求助/交流】酶切问题
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yanglinhui
铜虫
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专业: 观赏园艺学
[交流]
【求助/交流】酶切问题
已有4人参与
质粒DNA 做模板,条带很亮,做10微体系双酶切鉴定,但是电泳出现拖带 ,连载体也没有,以前从没出过这样的问题 。急,请大家帮忙喽
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1楼
2010-07-25 21:22:43
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sunyongle1
木虫
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专业: 肿瘤发生
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小木虫(金币
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amisking(金币+1):欢迎交流! 2010-07-25 22:30:57
是不是降解了?还有质粒做模板什么意思?是以质粒为模板扩出序列,然后再双酶切PCR产物吗?
[
Last edited by sunyongle1 on 2010-7-25 at 22:03
]
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2楼
2010-07-25 22:02:22
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yujiaping1
木虫
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注册: 2009-12-17
性别:
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专业: 疫苗学
★
小木虫(金币
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首先,看Marker怎么样,判断一下电泳是否出问题
之后,看酶切时间、温度有没有问题,看起来好像DNA都降解掉了
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3楼
2010-07-25 23:35:42
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guixiaohua
禁虫
(小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):分析的不错~ 2010-07-26 09:46:44
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4楼
2010-07-26 08:31:58
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周_yan
木虫
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注册: 2010-06-02
性别: GG
专业: 植物生理与生化
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
我认为你那酶切的时间可能有些长都切断了,还有可能质粒的量加的少,与做的胶和电泳液也有关系。最主要的应该是酶切时间过长,可以缩短一下酶切时间,做几个梯度试一试。
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5楼
2010-07-26 11:00:38
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