24小时热门版块排行榜    

查看: 1097  |  回复: 3

wyandck

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】怎么验证我的RNA能不能用? 已有3人参与

我原来一直用试剂盒提我材料成苗根上的RNA的,都是两条带,还不错。这几天我要提胚根上的RNA,用的是同样的方法,电泳检测却没有带了。我就反转录了一下,然后用actin基因引物扩了一下,竟然有带,而且带挺亮。我就又怀疑是不是我的材料中有DNA没有除净呀,我就加了DNase I,但是看有的资料上说DNase I可以降解DNA对后续反应的污染,但是有的资料上说它降解的DNA产物为200bp的2倍,那岂不是仍然有可能在后续反应中作为模板?我准备找一管原来提的DNA样,和我提的RNA一起,都加入DNase I,然后RT-PCR,如果都有带,说明用DNase I降解DNA是不行的,如果DNA的无带,而RNA的样有带,哈哈,是不是说明我的RNA虽然检测不到,但是是痕量,仍然能扩增,不知我的想法对不对?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-25 19:28:04
定量看看,OD260与280的比值,如果对于RNA纯制品,其 OD260/OD280大约在2.0左右,OD260/OD230应大于2。
2楼2010-07-25 17:40:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
1949stone:不要纯表情 2010-07-25 19:27:56
3楼2010-07-25 18:20:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunyongle1

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2):欢迎交流! 2010-07-25 21:21:42
引用回帖:
Originally posted by wyandck at 2010-07-25 17:10:32:
我原来一直用试剂盒提我材料成苗根上的RNA的,都是两条带,还不错。这几天我要提胚根上的RNA,用的是同样的方法,电泳检测却没有带了。我就反转录了一下,然后用actin基因引物扩了一下,竟然有带,而且带挺亮。我 ...

楼主的方案是可以的,但是DNA不要太多,不然降解不完全。还有消化完后,一定要回收,不然都会没带呵呵。而且你用actin扩出来带后,不一定扩出你的目的基因。引物丰度会比actin低很多
4楼2010-07-25 20:08:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wyandck 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 17:48 by ZJTJZ
[基金申请] filecode +6 documentary 2026-08-10 6/300 2026-08-10 17:09 by wdc28
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] FileCode能看出啥? +4 要乐观耀哥 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:02 by 天神眷顾
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +14 Lanmanbaby 2026-08-09 22/1100 2026-08-10 14:57 by wwncly
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +10 yufeiwaner 2026-08-09 10/500 2026-08-10 13:44 by cdutwml
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
信息提示
请填处理意见