24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 944  |  回复: 3

wyandck

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】怎么验证我的RNA能不能用? 已有3人参与

我原来一直用试剂盒提我材料成苗根上的RNA的,都是两条带,还不错。这几天我要提胚根上的RNA,用的是同样的方法,电泳检测却没有带了。我就反转录了一下,然后用actin基因引物扩了一下,竟然有带,而且带挺亮。我就又怀疑是不是我的材料中有DNA没有除净呀,我就加了DNase I,但是看有的资料上说DNase I可以降解DNA对后续反应的污染,但是有的资料上说它降解的DNA产物为200bp的2倍,那岂不是仍然有可能在后续反应中作为模板?我准备找一管原来提的DNA样,和我提的RNA一起,都加入DNase I,然后RT-PCR,如果都有带,说明用DNase I降解DNA是不行的,如果DNA的无带,而RNA的样有带,哈哈,是不是说明我的RNA虽然检测不到,但是是痕量,仍然能扩增,不知我的想法对不对?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-25 19:28:04
定量看看,OD260与280的比值,如果对于RNA纯制品,其 OD260/OD280大约在2.0左右,OD260/OD230应大于2。
2楼2010-07-25 17:40:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
1949stone:不要纯表情 2010-07-25 19:27:56
3楼2010-07-25 18:20:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunyongle1

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2):欢迎交流! 2010-07-25 21:21:42
引用回帖:
Originally posted by wyandck at 2010-07-25 17:10:32:
我原来一直用试剂盒提我材料成苗根上的RNA的,都是两条带,还不错。这几天我要提胚根上的RNA,用的是同样的方法,电泳检测却没有带了。我就反转录了一下,然后用actin基因引物扩了一下,竟然有带,而且带挺亮。我 ...

楼主的方案是可以的,但是DNA不要太多,不然降解不完全。还有消化完后,一定要回收,不然都会没带呵呵。而且你用actin扩出来带后,不一定扩出你的目的基因。引物丰度会比actin低很多
4楼2010-07-25 20:08:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wyandck 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +7 张zic 2026-04-05 8/400 2026-04-05 22:57 by Hdyxbekcb
[考研] 一志愿河北工业大学材料工程,初试344求专硕调剂 +3 15933906766 2026-04-05 3/150 2026-04-05 22:17 by dongzh2009
[考研] 材料调剂 +7 一样YWY 2026-04-05 8/400 2026-04-05 21:20 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +7 张.1 2026-04-05 7/350 2026-04-05 20:40 by 啵啵啵0119
[考研] 0860 求调剂 一志愿国科大 348 分 +3 WiiiP 2026-04-03 3/150 2026-04-05 17:43 by Ecowxq666!
[考研] 求调剂 +3 电气小神童 2026-04-04 3/150 2026-04-05 10:17 by barlinike
[考研] 考研调剂 +3 mcbbc 2026-04-04 3/150 2026-04-05 10:03 by barlinike
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-04 4/200 2026-04-05 09:44 by zhq0425
[考研] 342求调剂 +3 Liang7111 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:47 by dongzh2009
[考研] 309求调剂 +4 快乐的小白鸽 2026-04-04 5/250 2026-04-04 15:55 by cql1109
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 292求调剂 +21 是妍子也是研子 2026-03-30 22/1100 2026-04-03 21:44 by qlm5820
[考研] 334求调剂 +9 Trying] 2026-03-31 9/450 2026-04-03 15:18 by 琢珥丶
[考研] 学硕化学工程与技术,一志愿中国海洋大学320+求调剂 +8 披星河 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:12 by oooqiao
[考研] 一志愿北京科技大学材料学硕328分求调剂 +6 1段时间 2026-03-31 7/350 2026-04-02 13:57 by 3041
[考研] 材料专业求调剂 +10 月月鸟木 2026-04-01 10/500 2026-04-02 12:57 by wxiongid
[考研] 08开头看过来!!! +4 wwwwffffff 2026-03-31 6/300 2026-04-02 11:42 by 均值回归
[考研] 0855机械初试280求调剂 +3 kazenotori 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:08 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西交大080500材料学硕349 +6 jqx1258 2026-03-31 7/350 2026-03-31 21:08 by yuq
[考研] 考研调剂求助 +7 13287130938 2026-03-31 7/350 2026-03-31 16:39 by 690616278
信息提示
请填处理意见