24小时热门版块排行榜    

查看: 912  |  回复: 3

wyandck

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】怎么验证我的RNA能不能用? 已有3人参与

我原来一直用试剂盒提我材料成苗根上的RNA的,都是两条带,还不错。这几天我要提胚根上的RNA,用的是同样的方法,电泳检测却没有带了。我就反转录了一下,然后用actin基因引物扩了一下,竟然有带,而且带挺亮。我就又怀疑是不是我的材料中有DNA没有除净呀,我就加了DNase I,但是看有的资料上说DNase I可以降解DNA对后续反应的污染,但是有的资料上说它降解的DNA产物为200bp的2倍,那岂不是仍然有可能在后续反应中作为模板?我准备找一管原来提的DNA样,和我提的RNA一起,都加入DNase I,然后RT-PCR,如果都有带,说明用DNase I降解DNA是不行的,如果DNA的无带,而RNA的样有带,哈哈,是不是说明我的RNA虽然检测不到,但是是痕量,仍然能扩增,不知我的想法对不对?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-25 19:28:04
定量看看,OD260与280的比值,如果对于RNA纯制品,其 OD260/OD280大约在2.0左右,OD260/OD230应大于2。
2楼2010-07-25 17:40:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
1949stone:不要纯表情 2010-07-25 19:27:56
3楼2010-07-25 18:20:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunyongle1

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2):欢迎交流! 2010-07-25 21:21:42
引用回帖:
Originally posted by wyandck at 2010-07-25 17:10:32:
我原来一直用试剂盒提我材料成苗根上的RNA的,都是两条带,还不错。这几天我要提胚根上的RNA,用的是同样的方法,电泳检测却没有带了。我就反转录了一下,然后用actin基因引物扩了一下,竟然有带,而且带挺亮。我 ...

楼主的方案是可以的,但是DNA不要太多,不然降解不完全。还有消化完后,一定要回收,不然都会没带呵呵。而且你用actin扩出来带后,不一定扩出你的目的基因。引物丰度会比actin低很多
4楼2010-07-25 20:08:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wyandck 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工 323 英一+数二+物化,一志愿:哈工大 本人本科双一流 +4 自由的_飞翔 2026-03-13 5/250 2026-03-14 19:39 by hmn_wj
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家,不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 333求调剂 +3 球球古力 2026-03-09 3/150 2026-03-14 01:57 by JourneyLucky
[考研] 328,0703考生求调剂,一志愿为东北师范大学 +4 观素律 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:24 by JourneyLucky
[考研] 0703求调剂 +7 jtyq001 2026-03-10 7/350 2026-03-14 01:06 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[考研] 268求调剂 +4 好运连绵不绝 2026-03-12 4/200 2026-03-13 10:45 by hyswxzs
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +10 我想读研11 2026-03-10 10/500 2026-03-13 10:14 by Yuyi.
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
[考研] 化工0817调剂 +8 灿若星晨 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:44 by 星空星月
[考研] 数二英二309分请求调剂 +3 dtdxzxx 2026-03-09 4/200 2026-03-09 19:56 by yuningshan
信息提示
请填处理意见