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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】基因敲除
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brightjoe

至尊木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】基因敲除 已有5人参与

利用同源重组进行基因敲除什么情况下发生单交换，什么情况下发生双交换呢？
是不是跟所选择的同源序列有关呢？我有看到文献中选择目的基因两端侧翼同源序列构建敲除载体第一次交换整个载体插入到目的基因中，第二次交换目的基因缺失。单交换是否就意味着整个载体插入到目的基因中呢？
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1楼 2010-07-05 16:16:32
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erosionsdd

禁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-09 08:08:09
本帖内容被屏蔽
2楼2010-07-09 00:08:23
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feng__

金虫 (著名写手)

雾~蝶
如何鉴定基因敲除的纯合子呢
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会不会偶尔也会想起我....
3楼2010-09-13 16:43:42
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libinaizuqiu

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by erosionsdd at 2010-07-09 00:08:23
单交换是一个同源臂，双交换有两个同源臂…单交换是质粒插入到目的基因中，双交换是将目的基因置换下来了，比较直接…

你好，那单交换后质粒插入位置在哪里？会影响其他基因的表达吗？谢谢
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4楼2014-01-12 09:28:43
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三蛰

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by feng__ at 2010-09-13 16:43:42
如何鉴定基因敲除的纯合子呢

设计引物PCR验证
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我不会！
5楼2014-01-13 00:47:52
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by erosionsdd at 2010-07-09 00:08:23
单交换是一个同源臂，双交换有两个同源臂…单交换是质粒插入到目的基因中，双交换是将目的基因置换下来了，比较直接…

你好，如果选择目的基因两端侧翼同源序列构建敲除载体，是首先发生单交换，进一步筛选时发生双交换吗？谢
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做一个阳光、开朗的小和尚
6楼2014-01-13 08:43:58
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