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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何应用MAGE技术做基因敲除
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颜小泡泡

新虫 (初入文坛)

[交流] 如何应用MAGE技术做基因敲除 已有3人参与

各位大神，我是分子生物学小新手一枚，导师让用MAGE的方法做基因敲除，我看了半天MAGE，好像是mini-fragment analysis of gene expression，小片段基因表达分析，没看出和敲除有半点关系啊。。
求大家赐教，怎么能用MAGE的方法做敲除呢。。不甚感激！
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1楼 2013-09-22 23:18:14
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颜小泡泡

新虫 (初入文坛)
求大神回复。。谢谢了
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2楼2013-09-23 09:14:08
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颜小泡泡

新虫 (初入文坛)
怎么没人回呢。。
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3楼2013-09-23 11:56:33
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Renavatio

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
是不是mega nuclease?
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Undefined！
4楼2013-09-24 12:51:09
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-29 00:37:13
我只知道 Multiplex Automated Genomic Engineering (MAGE)  这个是做基因操作的
不过也不是用来敲除的，一般是做定向进化筛选
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5楼2013-09-28 22:55:01
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sangge1989

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-09-28 22:55:01
我只知道 Multiplex Automated Genomic Engineering (MAGE)  这个是做基因操作的
不过也不是用来敲除的，一般是做定向进化筛选

您好，跟您请教一下，我看09年NATURE上关于MAGE的一篇文章，里面用此技术筛选大肠杆菌，作者说是同时对24个基因（酶）进行筛选，作者是怎么确定经过MAGE的几个循环反应后，菌株中含有哪几个基因的突变呢？谢谢。
比如，想要筛选idi，dxs，dxr这三个基因对大肠杆菌MEP途径的影响，使用MAGE方法（大材小用了，只是举个例子）。此情况下，怎么控制经过MAGE循环后的菌种中，是含有哪个基因突变呢？
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    • 2013-10-09 16:44:44, 1.09 M
6楼2013-10-09 16:48:37
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by sangge1989 at 2013-10-09 16:48:37
您好，跟您请教一下，我看09年NATURE上关于MAGE的一篇文章，里面用此技术筛选大肠杆菌，作者说是同时对24个基因（酶）进行筛选，作者是怎么确定经过MAGE的几个循环反应后，菌株中含有哪几个基因的突变呢？谢谢。
...

mage本来就是通过表型分析的，把表型合适的挨个送去测序就是了
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7楼2013-10-09 20:59:07
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sangge1989

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-10-09 20:59:07
mage本来就是通过表型分析的，把表型合适的挨个送去测序就是了...

豁然开朗，谢谢了
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8楼2013-10-09 21:21:49
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