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颜小泡泡

新虫 (初入文坛)

[交流] 如何应用MAGE技术做基因敲除已有3人参与

各位大神,我是分子生物学小新手一枚,导师让用MAGE的方法做基因敲除,我看了半天MAGE,好像是mini-fragment analysis of gene expression,小片段基因表达分析,没看出和敲除有半点关系啊。。
求大家赐教,怎么能用MAGE的方法做敲除呢。。不甚感激!
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颜小泡泡

新虫 (初入文坛)

求大神回复。。谢谢了
2楼2013-09-23 09:14:08
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颜小泡泡

新虫 (初入文坛)

怎么没人回呢。。
3楼2013-09-23 11:56:33
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Renavatio

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是不是mega nuclease?
Undefined!
4楼2013-09-24 12:51:09
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-29 00:37:13
我只知道 Multiplex Automated Genomic Engineering (MAGE)  这个是做基因操作的
不过也不是用来敲除的,一般是做定向进化筛选
5楼2013-09-28 22:55:01
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sangge1989

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-09-28 22:55:01
我只知道 Multiplex Automated Genomic Engineering (MAGE)  这个是做基因操作的
不过也不是用来敲除的,一般是做定向进化筛选

您好,跟您请教一下,我看09年NATURE上关于MAGE的一篇文章,里面用此技术筛选大肠杆菌,作者说是同时对24个基因(酶)进行筛选,作者是怎么确定经过MAGE的几个循环反应后,菌株中含有哪几个基因的突变呢?谢谢。
比如,想要筛选idi,dxs,dxr这三个基因对大肠杆菌MEP途径的影响,使用MAGE方法(大材小用了,只是举个例子)。此情况下,怎么控制经过MAGE循环后的菌种中,是含有哪个基因突变呢?

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  • 附件 1 : Wang-2009-Programmingcellsby.pdf
  • 2013-10-09 16:44:44, 1.09 M
6楼2013-10-09 16:48:37
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by sangge1989 at 2013-10-09 16:48:37
您好,跟您请教一下,我看09年NATURE上关于MAGE的一篇文章,里面用此技术筛选大肠杆菌,作者说是同时对24个基因(酶)进行筛选,作者是怎么确定经过MAGE的几个循环反应后,菌株中含有哪几个基因的突变呢?谢谢。
...

mage本来就是通过表型分析的,把表型合适的挨个送去测序就是了
7楼2013-10-09 20:59:07
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sangge1989

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by Haibara_Ai at 2013-10-09 20:59:07
mage本来就是通过表型分析的,把表型合适的挨个送去测序就是了...

豁然开朗,谢谢了
8楼2013-10-09 21:21:49
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