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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 能否在同一株植物中做基因敲除和过表达？
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zhiwu7386

金虫 (正式写手)

[求助] 能否在同一株植物中做基因敲除和过表达？

在同一株植物上，能否先利用农杆菌转染植物敲除基因1，出现不正常表型后再在同一植株上转染携带基因1的过表达的菌，检测能否恢复表型。这种方案可行吗？如何操作。谢谢各位了！
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1楼 2013-01-20 11:02:48
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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zhiwu7386: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2013-01-20 11:25:30
不知道你是什么植物，你说“农杆菌转染植物敲除基因1”你是想用siRNA来做吗？如果是siRNA然后再过表达基因1我觉得表型rescue可能会有，但可能也不太那么明显。

如果，你能订购到基因1的诸如T-DNA或者其他突变体来观察表型，然后再转入基因1能否rescue该表型
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2楼2013-01-20 11:17:29
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zhiwu7386

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-01-20 11:17:29
不知道你是什么植物，你说“农杆菌转染植物敲除基因1”你是想用siRNA来做吗？如果是siRNA然后再过表达基因1我觉得表型rescue可能会有，但可能也不太那么明显。

如果，你能订购到基因1的诸如T-DNA或者其他突变体来 ...

我做的是拟南芥.
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3楼2013-01-20 11:25:17
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gyesang

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引用回帖:
3楼: Originally posted by zhiwu7386 at 2013-01-20 11:25:17
我做的是拟南芥....

那你应该可以买到你的基因的T-DNA突变体，拿突变体观察表型更好，然后你觉得有必要可以转过表达的rescue表型试试
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4楼2013-01-20 11:56:21
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
你先查一下有没有现成的T-DNA lines，这样就不用自己做敲除了。然后在敲除基因背景下做过表达当然是可以的。一般过表达也需要在基因敲除背景下做，否则容易造成基因沉默。
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5楼2013-01-20 12:52:24
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