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zzw1221

木虫 (著名写手)

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[交流] 【求助/交流】BAC 质粒抽提已有10人参与

omega 公司的E.Z.N.A.® BAC/PAC DNA Kit这个试剂盒有人用过吗，怎么样，盼告知，谢谢

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1楼 2010-07-01 19:16:48

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zzw1221

木虫 (著名写手)

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引用回帖:

Originally posted by zemin_fang at 2010-07-02 09:42:59:
一直按照分子克隆上的方法，提取出来的DNA含有RNA，但是消化过夜就好了，对酶切、PCR也没有影响

谢谢，我用过，
pcr肯定没问题的，我要用来测序，我这个大于120kb，低拷贝的，所以那个方法我改进了很多，效果还是不怎么好。十分感谢

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6楼2010-07-02 09:55:58

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zhaohq1209

铁杆木虫 (著名写手)

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★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-01 22:30:19
zzw1221(金币+1): 2010-07-02 10:04:51

lz说的这个kit是美国产的，说明书上有两种方法：一种是standard method，其实就是碱裂解+过柱纯化，适用于拷贝数比较高的质粒；另外一种适用于拷贝数低的质粒，碱裂解+乙醇沉淀，但比手工提取的效果要好。其中的任何一种方法都比手工提取的纯度要高，提取的核酸用来酶切和PCR没有问题。

lz有什么需要可以跟我站内联系。祝实验顺利！

[ Last edited by zhaohq1209 on 2010-7-1 at 22:25 ]

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我有一个梦想，我梦想有一天，我们的人民可以根据自己的意愿与消费能力，居住在自己愿意居住的地方。