应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】克隆连接时间
31/1返回列表
查看: 2453  |  回复: 18
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xiaoru2010

[交流] 【求助/交流】克隆连接时间 已有11人参与

问一下大家做克隆的时候，一般多少度连接多长时间啊？我用的是PMD19-T载体，上次16度连了23小时，有个1000多的片段还是没连上，菌液PCR出现好多条带……PS：貌似PGEM-T载体25度时间长了什么也连不上
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-06-23 11:16:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zemin_fang

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):热心虫友。 2010-06-23 16:11:58
16°连接2个小时就够了，主要是载体与外源片段的比例要合适，我做连接的体系是载体0.5ul，加入外源DNA与载体比例为1:5——1：10，连接buffer5ul，用水补到10ul。
还有一点是要确保你的外源片段加入了A
赞一下(2人) 回复此楼
11楼2010-06-23 15:07:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zemin_fang

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还有重要的一点，TaKaRa载体试剂盒质量不是很稳定，所以在做连接的时候一定要用盒子里的载体做对照实验，确保载体酶问题。
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2010-06-23 15:09:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaoru2010 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭