应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS蛋白电泳求助
71/1返回列表
查看: 1171  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

安氏

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】SDS蛋白电泳求助 已有6人参与

最近做SDS蛋白电泳，菌液超声破碎时用的缓冲的PH6.6的磷酸钾缓冲，破碎后取上清，加入SDS蛋白电泳的buffer，95度煮五分钟后，酶液总是呈近似固体状，无法点样，如果破碎时缓冲是PH8.0的话，就不会凝固，是不是酸性的缓冲会与电泳的buffer起什么反应啊？电泳buffer的成分是SDS，β-巯基乙醇，甘油，溴酚兰和PH6.8的Tris-HC
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-06-01 08:49:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-07-05 15:01:08
引用回帖:
Originally posted by 安氏 at 2010-06-01 08:49:41:
最近做SDS蛋白电泳，菌液超声破碎时用的缓冲的PH6.6的磷酸钾缓冲，破碎后取上清，加入SDS蛋白电泳的buffer，95度煮五分钟后，酶液总是呈近似固体状，无法点样，如果破碎时缓冲是PH8.0的话，就不会凝固，是不是酸性 ...

关键是：SDS遇过多的 K+ 会产生絮状沉淀！

建议你的破菌缓冲液改用 Tris-HCl 。
另，如果单纯地看全菌体 电泳图谱，根本不用破碎，拿发酵液和电泳buffer 一起煮5min 即可。
赞一下(2人) 回复此楼
【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2010-06-01 09:10:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议用Tris或者HEPES缓冲系统
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-06-01 09:58:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

安氏

金虫 (正式写手)
非常感谢
回复此楼
4楼2010-06-01 10:18:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengjiess

木虫 (著名写手)
SDS遇到K+会变成絮状沉淀？
赞一下 回复此楼
选择了就不要后悔
5楼2010-07-05 14:57:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天外飞仙→顺

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-05 16:52:43
给你个好的办法，，不用超声，，直接煮沸菌体(10min)后离心取上清，保你成功！！我都是这么做的！！！祝你顺利
赞一下(2人) 回复此楼
我无法改变自己的出生，但我可以决定自己的命运：命中注定我是一个王者，我必须拿出王者的风范！！！
6楼2010-07-05 15:36:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秀才ecust

新虫 (初入文坛)
直接煮沸菌体离心后取上清，全细胞的就不好做了
赞一下 回复此楼
7楼2010-12-24 16:50:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 安氏 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 268求调剂 +8 一定有学上- 2026-03-14 9/450 2026-03-17 17:47 by laoshidan
[考研] 344求调剂 +4 knight344 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:27 by ruiyingmiao
[考研] 296求调剂 +4 大口吃饭 身体健 2026-03-13 4/200 2026-03-17 17:20 by 呦呦忧郁
[考研] 302求调剂 +9 负心者当诛 2026-03-11 9/450 2026-03-17 17:13 by ruiyingmiao
[考研] 332求调剂 +6 Zz版 2026-03-13 6/300 2026-03-17 17:03 by ruiyingmiao
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
[考研] 工科，求调剂 +3 我887 2026-03-11 3/150 2026-03-13 21:39 by JourneyLucky
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8 努力奋斗112 2026-03-12 9/450 2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 290求调剂 +3 柯淮然 2026-03-10 8/400 2026-03-11 13:48 by 柯淮然
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭