24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1212  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

安氏

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】SDS蛋白电泳求助 已有6人参与

最近做SDS蛋白电泳,菌液超声破碎时用的缓冲的PH6.6的磷酸钾缓冲,破碎后取上清,加入SDS蛋白电泳的buffer,95度煮五分钟后,酶液总是呈近似固体状,无法点样,如果破碎时缓冲是PH8.0的话,就不会凝固,是不是酸性的缓冲会与电泳的buffer起什么反应啊?电泳buffer的成分是SDS,β-巯基乙醇,甘油,溴酚兰和PH6.8的Tris-HC
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
建议用Tris或者HEPES缓冲系统
3楼2010-06-01 09:58:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-07-05 15:01:08
引用回帖:
Originally posted by 安氏 at 2010-06-01 08:49:41:
最近做SDS蛋白电泳,菌液超声破碎时用的缓冲的PH6.6的磷酸钾缓冲,破碎后取上清,加入SDS蛋白电泳的buffer,95度煮五分钟后,酶液总是呈近似固体状,无法点样,如果破碎时缓冲是PH8.0的话,就不会凝固,是不是酸性 ...

关键是:SDS遇过多的 K+ 会产生絮状沉淀!

建议你的破菌缓冲液改用 Tris-HCl 。
另,如果单纯地看全菌体 电泳图谱,根本不用破碎,拿发酵液和电泳buffer 一起煮5min 即可。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2010-06-01 09:10:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengjiess

木虫 (著名写手)

SDS遇到K+会变成絮状沉淀?
选择了就不要后悔
5楼2010-07-05 14:57:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天外飞仙→顺

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-05 16:52:43
给你个好的办法,,不用超声,,直接煮沸菌体(10min)后离心取上清,保你成功!!我都是这么做的!!!祝你顺利
我无法改变自己的出生,但我可以决定自己的命运:命中注定我是一个王者,我必须拿出王者的风范!!!
6楼2010-07-05 15:36:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 304求调剂 +10 素年祭语 2026-04-06 14/700 2026-04-08 08:19 by supralkaloid
[考研] 材料工程322 +14 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 15/750 2026-04-07 22:51 by 来看流星雨10
[考研] 306求调剂 +3 15287505595 2026-04-03 3/150 2026-04-07 18:08 by 蓝云思雨
[考研] 0854求调剂 +9 亨氏番茄沙司 2026-04-06 10/500 2026-04-07 14:37 by shdgaomin
[考研] 304求调剂 +14 c297914 2026-04-05 15/750 2026-04-07 11:15 by 诗与自由
[考研] 求调剂 +5 wos666 2026-04-03 5/250 2026-04-06 10:13 by 蓝云思雨
[考研] 324求调剂 +3 k可乐 2026-04-05 4/200 2026-04-06 09:54 by 蓝云思雨
[考研] 348求调剂 +3 车厘子zzz 2026-04-05 3/150 2026-04-05 20:30 by 啵啵啵0119
[考研] 085602调剂 初试总分335 +12 19123253302 2026-04-04 12/600 2026-04-05 08:08 by 544594351
[考研] 338求调剂 +7 晟功? 2026-04-03 7/350 2026-04-04 20:37 by 蓝云思雨
[考研] 一志愿华北电力大学(北京),材料科学与工程学硕265,求调剂 +11 yelck 2026-04-03 12/600 2026-04-04 19:52 by dongzh2009
[考研] 材料383求调剂 +5 郭阳阳阳成 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:06 by dongzh2009
[考研] 292求调剂 +11 2022080213 2026-04-04 13/650 2026-04-04 18:38 by macy2011
[考研] 265求调剂 +20 梁梁校校 2026-04-01 21/1050 2026-04-04 00:38 by userper
[考研] 学硕288调剂!!! +3 小王xw123 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:20 by 啵啵啵0119
[考研] 279求调剂 +6 qazplm0852 2026-04-02 6/300 2026-04-03 10:03 by 蓝云思雨
[考研] 298求B区调剂 +4 zzz,,r 2026-04-02 5/250 2026-04-02 12:17 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +3 cs0106 2026-04-02 5/250 2026-04-02 11:37 by olim
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 13/650 2026-04-02 09:17 by olim
[考研] 285求调剂 +11 AZMK 2026-04-01 11/550 2026-04-01 22:40 by peike
信息提示
请填处理意见