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Kirsten_hkm

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于PCR的问题 已有10人参与

这是我在小木虫上的处女贴。。。
诚心请教一下大家,最近跑PCR结果让我很挫败!两星期前很稳定的条件突然什么都跑不出了,连引物二聚体也没有,请问一下大家可能是什么原因?
还有,有时候取PCR结果时发现液体都在管壁上,离心了才会下来,会是什么原因?会对结果又影响吗?
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hong303030

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-05-23 16:22:42
可以试一下换一管新的酶再试一下,加入矿物油了吗?加了的话,应该不会蒸到管壁上吧,或者换一个PCR仪试一下,有可能是pcr仪热盖有问题,温度不稳定
5楼2010-05-23 16:05:11
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lyg7720349

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):有可能 2010-05-23 16:21:48
对于不出结果的问题,估计是你的酶有问题或者操作失误
   对于第二问题:你可能加好混合物P之前没有离心吧。
望大家都各有所获!
2楼2010-05-23 15:17:14
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cqyniu

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是换了什么组分呢?你做PCR的时候是不是没有热盖啊
4楼2010-05-23 15:46:58
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):有可能 2010-05-23 16:22:32
同意楼上,首先解决热盖的问题,很有可能突然不出了,就是关闭了热盖,或者热盖坏了。
我感觉你现在管中的液体不是挂在管壁上,而是都蒸到管盖上了,那肯定什么都做不出来的,你观察一下
6楼2010-05-23 16:09:34
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