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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】单酶切连接的克隆急……
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haoqian6135

木虫 (正式写手)

蜗牛～

[交流] 【求助/交流】单酶切连接的克隆急…… 已有9人参与

最近做得克隆是单酶切连接的，各种连接体系都试过了就是连不上，各位高手给点意见，如何提高单酶切的连接率，我的酶切位点是EcoR1.
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平和悦衲！
1楼 2010-05-19 16:01:27
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jasco

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by haoqian6135 at 2010-05-20 09:18:49:
又做了一个去磷的，但回收后载体量非常少，核酸电泳都看不见，能连吗？

再少也要试试看，除非你的外源片段很珍贵
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8楼2010-05-20 09:45:00
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-19 16:48:39
最好是降载体去磷酸化以后再做连接。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-05-19 16:05:54
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xuwei1759

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
将载体先去磷酸化，然后再连接试一试。
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纵然春去落花笑，待到秋实何人傲？
3楼2010-05-19 16:06:16
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同意楼上二位～
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4楼2010-05-19 16:17:15
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