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zhy98

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】怎么样分析蛋白变性? 已有3人参与

看到文献中有用SDS-PAGE, DSC, 巯基和活性巯基等,不知道这些方法有什么特点,分别能得出哪些方面的结论。望知道的朋友详细告诉,谢谢!!
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djfeng0617

木虫 (正式写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
hawkyin(金币+1):谢谢回贴 2010-05-13 09:13:50
SDS-PAGE是做电泳啊,SDS是变性剂,加巯基是为了分析蛋白中有没有二硫键;DSC可以分析出蛋白的变性温度。你要是想知道蛋白有没有变性,你可以做一下红外,变性前后都测一下,峰会有变化的。个人观点啊,不对也请指出!
2楼2010-05-09 21:49:08
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zhy98

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by djfeng0617 at 2010-05-09 21:49:08:
SDS-PAGE是做电泳啊,SDS是变性剂,加巯基是为了分析蛋白中有没有二硫键;DSC可以分析出蛋白的变性温度。你要是想知道蛋白有没有变性,你可以做一下红外,变性前后都测一下,峰会有变化的。个人观点啊,不对也请指 ...

谢谢啊,有看到别人分析变性用到了红外的~~ 差不多这些都测了,然后再综合分析下,现在实验中就是遇到这方面的难题,不知道怎么下手。。。
3楼2010-05-11 16:07:08
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djfeng0617

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你要是就只蛋白变性问题,你可以就做下红外,电泳是分析不出蛋白是不是变性,因为它本来就要蛋白变性以后在做的
4楼2010-05-13 13:00:01
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syuchenj

金虫 (正式写手)

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lwb1987521(金币+1):感谢交流 2010-05-13 15:33:26
所谓变性,就是蛋白质的高级结构发生了变动。
那么测定结构变动的程度、宏观性质的变化,就可以看得出。
微观结构,可以采用固态和溶液体系,
比如可以采用光散射,看溶液性质的变动
采用CD,看二级结构、三级结构
采用紫外,也大概看得出一些基团变动
当然采用电泳,利用还原-非还原,可以看出聚集的原因
测定各种基团,可以看出变性的结构点
……
方法很多啦,看你的目的!
5楼2010-05-13 14:58:55
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