应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求教电泳的基本问题
51/1返回列表
查看: 926  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

蓝色雪狐

金虫 (正式写手)

欧洲漂流

[交流] 【求助/交流】求教电泳的基本问题 已有4人参与

各位虫友，小弟新近做电泳，主要做蛋白的，SDS-PAGE，也做PAGE。目前刚上手，因此想找本书了解一下电泳实验技术。请教各位，能否告知一本比较好的介绍电泳实验技术的书籍给小弟？如果方便，希望附上您的简单评论。谢谢！

不胜感激，谢谢！一点金币不成敬意……

[ Last edited by 蓝色雪狐 on 2010-5-1 at 20:56 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-05-01 20:55:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木星海

金虫 (正式写手)
★ ★
蓝色雪狐(金币+3):谢谢你的经验之谈~ 2010-05-04 12:09
lstt09nk(金币+2):认真实验的MM，赞~~ 2010-05-04 12:23
我自己也经常做SDS-PAGE，只是有时候掌握不好 常常效果不怎么样
所以，我总结了几个要注意的小点，发现只要能好好注意这些方面，一般问题不大。
1、有专门的文章分析浓缩胶和分离胶的接缝不密合问题。找来看！
2、胶面比较脏，要检查染液是不是用的久了，可以用滤纸和漏斗过滤一下；
3、每次配完胶不要马上跑电泳，时间多的话，最好放上一天半天再用，因为刚做完的胶，看着是凝固了，但里面有可能还没有聚合；也尽量不要放到4度冰箱保存，SDS在低温下会结晶析出；
4、在做胶前，玻璃板要洗干净，可能之前有人做后玻璃板没有洗干净，有时候别人有手指印留在上面，有油性，影响蛋白质的迁移；
5、染色的时候要注意，染液要比较烫会好一些，我一般微波染色三次，第一次20s，第二、三次10s；加入SDS的量要根据蛋白质的含量来确定，跑胶之前可以先测一下蛋白含量，如果加入量太多，可能会导致蛋白稀释太厉害，也会挤着旁边的蛋白条带。
6、配胶的时候尽量把板放平，做好了胶，也不要去动它，不然会容易歪了，到时候蛋白质就不会在同一起跑线上了；
7、电泳时注意不要把电极插反；
8、脱色不宜太久，一般过夜后观察，如果没有脱干净，可以换上脱色液再在摇床上摇半个小时基本上就可以了。
赞一下(2人) 回复此楼
我爱小木虫！
5楼2010-05-04 10:50:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

guoenwen

金虫 (小有名气)
★ ★
蓝色雪狐(金币+2):谢谢交流经验心得~ 2010-05-02 10:13
1949stone(金币+2): 2010-05-02 14:35
没有太多讲究的，我们天天做，不过想跑的很漂亮，泳道上下条带都很清晰确实很难，看过老外有跑出很好的效果的。
说一下我做SDS-PAGE的经验吧，首先是把胶板做好，然后样品处理好也很关键，不要忘了离心一下，点样的时候尽量使样品在胶空里紧凑一些，正常电压跑出来，脱色的时候细致一点，不要脱过了就行。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-05-02 09:01:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
蓝色雪狐(金币+1):谢谢 2010-05-04 11:02
要是表达量很高的话，按步骤来就可以，精准点就做WESTERNBLOT.
赞一下 回复此楼
4楼2010-05-04 10:30:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
同意楼上的～
回复此楼
6楼2010-05-04 11:38:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 274求调剂 +5 顾九笙要谦虚 2026-03-24 5/250 2026-03-24 18:43 by jhhcooi
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 材料与化工328分调剂 +4 。，。，。，。i 2026-03-23 4/200 2026-03-24 11:03 by 544594351
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +18 chaojifeixia 2026-03-19 20/1000 2026-03-24 10:34 by dolphin_ycj
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 0703化学求调剂 +4 奶油草莓. 2026-03-22 5/250 2026-03-23 19:37 by pswait
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 化学调剂 +5 yzysaa 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:12 by peike
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭