| 查看: 924 | 回复: 5 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
蓝色雪狐金虫 (正式写手)
欧洲漂流
|
[交流]
【求助/交流】求教电泳的基本问题 已有4人参与
|
||
|
各位虫友，小弟新近做电泳，主要做蛋白的，SDS-PAGE，也做PAGE。目前刚上手，因此想找本书了解一下电泳实验技术。请教各位，能否告知一本比较好的介绍电泳实验技术的书籍给小弟？如果方便，希望附上您的简单评论。谢谢！ 不胜感激，谢谢！一点金币不成敬意…… [ Last edited by 蓝色雪狐 on 2010-5-1 at 20:56 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有215人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教大家关于双向电泳的问题~
已经有4人回复
- Bio-rad蛋白电泳的问题请教，有图，希望有经验者多多指教！
已经有27人回复
- 请教盐酸胍助溶冻干蛋白干粉时，羟胺裂解后 ，跑电泳问题！！！！
已经有5人回复
- 求教DGGE相关的基本问题（做过的请指教）
已经有8人回复
- 做SRAP标记的进来，DNA聚丙烯酰胺电泳，预电泳问题。。。
已经有22人回复
- Western Blot电泳蛋白质外漏问题求助
已经有22人回复
- 【求助】毛细管电泳的几个问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】请教琼脂糖凝胶电泳问题
已经有18人回复
- 【求助/交流】PCR产物酶切后，电泳时遇到的的问题，真心求教！
已经有9人回复
- 【求助/交流】酶切电泳问题
已经有12人回复
- 【求助/交流】请教一个DNA电泳的问题
已经有14人回复
liyong1981 
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 774.1
- 散金: 116
- 帖子: 905
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 357405
- 注册: 2007-04-27
- 性别: GG
- 专业: antibody
4楼2010-05-04 10:30:43
3楼2010-05-02 09:01:51
木星海
金虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 1153.9
- 散金: 100
- 红花: 2
- 帖子: 519
- 在线: 107.1小时
- 虫号: 974499
- 注册: 2010-03-18
- 性别: MM
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
★ ★
蓝色雪狐(金币+3):谢谢你的经验之谈~ 2010-05-04 12:09
lstt09nk(金币+2):认真实验的MM，赞~~ 2010-05-04 12:23
蓝色雪狐(金币+3):谢谢你的经验之谈~ 2010-05-04 12:09
lstt09nk(金币+2):认真实验的MM，赞~~ 2010-05-04 12:23
|
我自己也经常做SDS-PAGE，只是有时候掌握不好 常常效果不怎么样 所以，我总结了几个要注意的小点，发现只要能好好注意这些方面，一般问题不大。 1、有专门的文章分析浓缩胶和分离胶的接缝不密合问题。找来看！ 2、胶面比较脏，要检查染液是不是用的久了，可以用滤纸和漏斗过滤一下； 3、每次配完胶不要马上跑电泳，时间多的话，最好放上一天半天再用，因为刚做完的胶，看着是凝固了，但里面有可能还没有聚合；也尽量不要放到4度冰箱保存，SDS在低温下会结晶析出； 4、在做胶前，玻璃板要洗干净，可能之前有人做后玻璃板没有洗干净，有时候别人有手指印留在上面，有油性，影响蛋白质的迁移； 5、染色的时候要注意，染液要比较烫会好一些，我一般微波染色三次，第一次20s，第二、三次10s；加入SDS的量要根据蛋白质的含量来确定，跑胶之前可以先测一下蛋白含量，如果加入量太多，可能会导致蛋白稀释太厉害，也会挤着旁边的蛋白条带。 6、配胶的时候尽量把板放平，做好了胶，也不要去动它，不然会容易歪了，到时候蛋白质就不会在同一起跑线上了； 7、电泳时注意不要把电极插反； 8、脱色不宜太久，一般过夜后观察，如果没有脱干净，可以换上脱色液再在摇床上摇半个小时基本上就可以了。 |
5楼2010-05-04 10:50:19
liyong1981
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 774.1
- 散金: 116
- 帖子: 905
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 357405
- 注册: 2007-04-27
- 性别: GG
- 专业: antibody
6楼2010-05-04 11:38:52
