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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】ITS模板要求，PCR体系要求
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baojunboy04

[交流] 【求助/交流】ITS模板要求，PCR体系要求已有5人参与

最近在跑ITS总是跑不出来


测得的模板浓度是30-40，OD值在1.0-1.4
PCR体系：
buffer:2.5
mg:1.5
dntp:1.5
引物：各1.5
taq:0.3
模板：2
水：14.2
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1楼2010-04-09 12:08:25
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baojunboy04
scelab:你好，除资源帖和灌水帖外，请勿纯表，谢谢！ 2010-04-10 11:48
3楼2010-04-09 15:10:47
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baojunboy04

引用回帖:
Originally posted by ghost9106 at 2010-04-10 13:17:24:
ITS引物有好几对呢，可能换一下试试。

谢谢
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5楼2010-04-12 22:10:41
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baojunboy04

引用回帖:
Originally posted by lhm_hnyj at 2010-04-14 19:56:50:
我最近还遇到挺奇怪的问题呢，摸索退火温度时设了梯度，52度能扩出来，不设梯度了，其他条件都一样，连放的孔都一致，试了好几次都没扩出来，更是头大呢

ITS本身是不是对模板质量要求就比较高啊？我发现多头的很好扩，而单头的小型昆虫（螨）非常难扩，之前的chelex、STE单头提法都扩不出来，很是郁闷
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9楼2010-04-28 20:59:31
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