应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 引物设计求助~
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
141/2返回列表12下一页
查看: 2150  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2009-10-17 20:25:18
已阅   同方向广播   申请BioEPI   回复此楼   编辑   删除   查看我的主页

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你一定要在上游加个Nco1吗？Nco1中有个ATG起始密码子，很可能会使的阅读框错读，影响你的表达。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2009-10-17 20:40:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1、你想怎么个克隆法，先把基因克隆到T载体上呢，还是直接切PCR产物，装到pET载体上？如果先克隆到T载体上你就用不着加保护碱基，如果想直接酶切PCR产物，然后装pET载体，就要加保护碱基了，至少3个，一般为3个
2、 pET有pET28和pET32系列，每种又有abc(+)-之分，要根据你所用的是哪一个载体，才有可能考虑是否对读码框的问题，也就是蛋白在翻译的时候跟标签是in-frame-translation的，你把问题补充完整再帮你看啊
赞一下(1人) 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2009-10-17 20:41:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2009-10-17 21:04:12
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by mengfei8336 at 2009-10-17 21:04:
那我换个说法，CC ATG G CA TGA ATGACAATTAAAGAAAC……，这段序列加到pET载体上，翻译从第一个ATG开始，在其后第二个密码子是终止密码子。在表达时，能不能得到我想要的蛋白（ATGACAATTAAAGAAAC……翻译的产物）？

完全可以的。
回复此楼
5楼2009-10-18 00:01:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)
启动子可以将后面的进行表达。
赞一下 回复此楼
6楼2009-10-18 00:01:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
只要没错位就没问题
赞一下 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
7楼2009-10-18 10:14:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by zhuifeng7000 at 2009-10-18 00:01:
启动子可以将后面的进行表达。

有个疑问，我看别人做融合表达的时候需要将第一个基因的终止密码子突变，做共表达需要在第二个基因前加上启动子.

在T7启动子的调控下，翻译由pET载体上的ATG开始翻译（不是从你设计引物上ATG开始），如果在目的基因上ATG翻译之前，先终止一次的话，后面的目的基因在同一个T7启动子的作用下还可以继续翻译吗？

[ Last edited by susizheng on 2009-10-18 at 15:46 ]
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
8楼2009-10-18 15:34:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果按照楼主的设计，翻译先在目的基因ATG前面的终止密码子处终止，接着继续翻译目的蛋白，那样pET上的组氨酸标记没有加到目的蛋白上，会不会对以后的纯化带来困难。
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
9楼2009-10-18 15:40:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smurfen

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2009-10-18 15:40:
如果按照楼主的设计，翻译先在目的基因ATG前面的终止密码子处终止，接着继续翻译目的蛋白，那样pET上的组氨酸标记没有加到目的蛋白上，会不会对以后的纯化带来困难。

可以用C端得His吧
赞一下(1人) 回复此楼
Advances in Prevention of Thermal Runaway in Lithium-Ion Batteries
10楼2009-10-18 15:53:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mengfei8336 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 287求调剂 +7 land xuxu 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:44 by wxiongid
[考研] 329求调剂 +6 钮恩雪 2026-03-25 6/300 2026-03-26 22:50 by fmesaito
[考研] 333求调剂 +7 87639 2026-03-21 12/600 2026-03-26 22:08 by 不吃魚的貓
[考研] 303求调剂 +7 元夕元 2026-03-20 8/400 2026-03-26 20:38 by 不吃魚的貓
[考研] 312求调剂 +8 上岸吧ZJY 2026-03-22 12/600 2026-03-26 18:49 by muchong357
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +9 holy J 2026-03-21 9/450 2026-03-26 15:47 by 161765490
[考研] 279 分 求调剂 +3 睡个好觉_16 2026-03-24 3/150 2026-03-26 15:43 by zzll406
[考研] 一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂 +3 jl0720 2026-03-26 3/150 2026-03-26 13:39 by zzll406
[考研] 315分求调剂 +5 26考研上岸版26 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:11 by laoshidan
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分，求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 26考研-291分-厦门大学（085601）-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +3 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:22 by xcjcqu
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 315分，诚求调剂，材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 一志愿华中科技大学071000，求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭