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何琼杰

新虫 (小有名气)

[交流] Western blot 结果求助

最近做Western Blot总是出现一些问题，背景过深，且泳道之间都是黑色的，这是自己做的抗体，以前不是这个样子的，最近总是出现这种情况，同一张膜上的内参和买的抗体都很干净没有问题，就是自己做的抗体出现泳道变黑，这是什么情况，是抗体失效了还是浓度不合适呢，原来这个浓度是没有问题的，方法同原来一样

Western blot 结果求助
170822-FoxO-1s 2017.08.22_17.00.48_Ch+Marker.jpg
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1楼 2017-08-23 11:25:24
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Suph

银虫 (正式写手)
★
何琼杰(金币+1): 谢谢参与
抗体特异性不好？

发自小木虫IOS客户端
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2楼2017-08-23 11:41:25
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何琼杰

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Suph at 2017-08-23 11:41:25
抗体特异性不好？

原来还是可以的，起码泳道之间没有黑色背景，现在就是不知道为什么有黑色背景
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4楼2017-08-23 11:58:59
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star013

新虫 (知名作家)
★
何琼杰(金币+1): 谢谢参与
西门吹雪170: 屏蔽内容, 禁止发布商业性回帖 2017-08-23 23:06:23
本帖内容被屏蔽
6楼2017-08-23 14:44:41
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)
★
何琼杰(金币+1): 谢谢参与
You used more samples or the sample was not fully denatured?
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

何琼杰
7楼2017-08-24 06:21:49
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何琼杰

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by blackrose8089 at 2017-08-24 06:21:49
You used more samples or the sample was not fully denatured?

但是为什么买的抗体没有这种情况，自己做的抗体会出现这种情况呢？
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8楼2017-08-24 15:32:56
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木吉吉

新虫 (正式写手)
★
何琼杰(金币+1): 谢谢参与
会不会是显色那步的问题啊，有次嫌麻烦直接用的超敏，结果背景都黑得没眼看了

发自小木虫Android客户端
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9楼2017-08-25 19:04:19
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syhorchid3楼
2017-08-23 11:50   回复  
何琼杰(金币+1): 谢谢参与
wdxmu5楼
2017-08-23 12:23   回复  
何琼杰(金币+1): 谢谢参与
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