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jasonyuanjx铜虫 (初入文坛)
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western blot实验相关求助 已有1人参与
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本人跨方向做科研，属于新手一枚，现在在学习WB实验技术，请教虫友几个问题，希望细心解答，好答案加金币： 1，SDS-PAGE分离胶浓度的选择：在实验室随便找了几个抗体，想先摸遍WB流程，熟悉方法技术，所以抗体随意选择（目前实验室有220，80，48，25分子量的蛋白抗体供选择），内参选的是GAPDH，通过查阅文献GAPDH分子量是36，我选择80的目的蛋白可以吗？如果选48的会不会和内参太近，影响结果观察。如果选80的蛋白，选择10%的分离胶好，还是12%的分离胶好？ 2，分离胶浓度确定后，用多大的电压，跑多场时间为宜？ 3，转膜条件怎么选择？ |
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