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jasonyuanjx

铜虫 (初入文坛)

[求助] western blot实验相关求助已有1人参与

本人跨方向做科研,属于新手一枚,现在在学习WB实验技术,请教虫友几个问题,希望细心解答,好答案加金币:
1,SDS-PAGE分离胶浓度的选择:在实验室随便找了几个抗体,想先摸遍WB流程,熟悉方法技术,所以抗体随意选择(目前实验室有220,80,48,25分子量的蛋白抗体供选择),内参选的是GAPDH,通过查阅文献GAPDH分子量是36,我选择80的目的蛋白可以吗?如果选48的会不会和内参太近,影响结果观察。如果选80的蛋白,选择10%的分离胶好,还是12%的分离胶好?
2,分离胶浓度确定后,用多大的电压,跑多场时间为宜?
3,转膜条件怎么选择?
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cedriclin

金虫 (小有名气)

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