应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » western blot 求助
31/1返回列表
查看: 887  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ashap

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot 求助 已有1人参与

求助各位大虾，
我前后两次做WB电泳、转膜条件不变的情况下，只是根据第一次结果增加了一组的上样量，为什么第二次WB的内参三组样完全不齐，前两组条带特别不清楚。另外目的条带两次的都没有，以前做出来都有的。转膜条件是：湿转，恒流250mA，17KD大小蛋白PVDF膜0.22um, 时间为1小时，内参为a-tubulin，目的条带为90kD，PVDF膜0.45um，时间2小时。
有什么地方错的，或者遗漏的，求指出。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-09-01 21:51:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ssy7166

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这说明你WB做得太少了，说不准你是什么原因。是不是蛋白降解了？煮样条件不当？胶没有配好呀？running buffer是不是有问题呀？等等，一一排除吧。
赞一下 回复此楼
2楼2015-09-03 15:35:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ashap

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssy7166 at 2015-09-03 15:35:12
这说明你WB做得太少了，说不准你是什么原因。是不是蛋白降解了？煮样条件不当？胶没有配好呀？running buffer是不是有问题呀？等等，一一排除吧。

胶制得应该没问题，蛋白降解了？没有这么容易吧，变了性冻在-20保存的。电泳buffer对最后会有什么影响呢，不是主要影响最后条带的形状吗？
赞一下 回复此楼
3楼2015-09-04 13:36:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ashap 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +10 纸鱼ly 2026-03-21 11/550 2026-03-24 17:22 by qingfeng258
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 6/300 2026-03-24 15:03 by 余意卿
[考研] 321求调剂 +4 Ymlll 2026-03-24 4/200 2026-03-24 14:44 by sprinining
[考研] 081700 调剂 267分 +9 迷人的哈哈 2026-03-23 9/450 2026-03-24 11:58 by 544594351
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 291 求调剂 +4 化工2026届毕业� 2026-03-21 5/250 2026-03-23 16:46 by 化工2026届毕业�
[考研] 306求调剂 +9 chuanzhu川烛 2026-03-18 9/450 2026-03-23 13:17 by luoyongfeng
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 白QF 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:12 by zhukairuo
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 求调剂一志愿南京航空航天大学289分 +3 @taotao 2026-03-19 3/150 2026-03-20 21:34 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭