| 查看: 1850 | 回复: 5 | ||
[求助]
elisa显色问题 已有2人参与
|
刚刚开始接触生物这方面，想请教各位大神几个基础的问题 1. 酶标抗体如果没与抗原结合，加入底物后会发生显色吗？如果会的话，得到的结果不是不准确了？ 2. 待测抗原与固定抗体结合后进行洗涤，未结合的抗原被洗掉不会使原本样品中的抗原量降低吗？ 新人感到很迷茫，希望有有人能回复下，跪谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
朋友圈看到的
已经有5人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有110人回复
-
明天放榜？
已经有5人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有11人回复
-
重要消息，中午系统在维护
已经有10人回复
-
两姐妹，一个辛辛苦苦30岁工作当大学教师，另一个23岁就工作当开车教练
已经有7人回复
-
投稿咨询
已经有6人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有26人回复
-
今天维护系统维护 祝所有人 高中
已经有9人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有16人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 免疫组化显色问题，新手求助
已经有3人回复
- ELISA阴性对照显色问题
已经有9人回复
- 急切求助，ELISA空白孔显色
已经有4人回复
- ELISA试验不显色，希望得到大家帮助
已经有41人回复
- 包涵体蛋白做间接ELISA，显色不稳定，望做过的高手帮忙看一下，万分感激！！！
已经有2人回复
- ELISA 不显色 急急急
已经有7人回复
- 有关间接竞争ELISA及标品稀释问题
已经有2人回复
- 求助Elisa实验捕获后的洗脱问题
已经有4人回复
- 连续做了两边ELISA，为什么会不显色呢？
已经有5人回复
- ELISA显色
已经有1人回复
- 金标试纸条，空白样品，T线显色，C线不显色，问题可能出在哪里？
已经有3人回复
- 双抗体夹心ELISA，阳性孔，样品孔和阴性对照全部不显色，怎么回事
已经有12人回复
- ELISA 的问题
已经有5人回复
- ELISA 显色液空白OD偏高，P/N偏小，是否可以每孔OD减去显色液对照的值?
已经有5人回复
- ELISA遇到问题，向各位大侠请教
已经有11人回复
- 求助ELISA实验中OPD的显色时间问题
已经有1人回复
- ELISA问题
已经有1人回复
- ELISA测抗体效价的准确性问题
已经有2人回复
- ELISA TMB显色液怎么配制？我配的怎么一混合就浑浊了？
已经有13人回复
- ELISA抗体检测的显色剂和终止液的问题
已经有4人回复
- Elisa 包被
已经有18人回复
- 【求助/交流】ELISA中，OPD显色液的处理问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】大家在做间接ELISA时显色液配置时的问题。
已经有3人回复
- 【分享】ELISA试验常见问题
已经有5人回复
wuhu0612331
铜虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 3526.1
- 散金: 221
- 红花: 16
- 帖子: 999
- 在线: 159.1小时
- 虫号: 3232337
- 注册: 2014-05-25
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
2楼2016-10-19 04:24:54
3楼2016-10-19 09:30:29
wuhu0612331
铜虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 3526.1
- 散金: 221
- 红花: 16
- 帖子: 999
- 在线: 159.1小时
- 虫号: 3232337
- 注册: 2014-05-25
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
4楼2016-10-19 23:20:45
biotech_zhou
木虫 (著名写手)
待人以诚：专业/专注/专心
- 应助: 373 (硕士)
- 金币: 2037.6
- 散金: 206
- 红花: 6
- 帖子: 1441
- 在线: 317.6小时
- 虫号: 3078402
- 注册: 2014-03-21
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
5楼2016-12-22 14:10:42
yyy0305
至尊木虫 (著名写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 114 (高中生)
- 金币: 9567.5
- 散金: 50
- 红花: 30
- 帖子: 1486
- 在线: 383.6小时
- 虫号: 1571969
- 注册: 2012-01-10
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
【答案】应助回帖
|
楼主应该是在用双抗夹心法检测抗原，抗体1包被，和抗原反应，然后加酶标抗体反应，最后显色。 问题1：你说的这种情况是存在的，出现这种情况的原因是酶联抗体直接非特异吸附在酶标板条表面了，或者和包被抗体反应的。关于非特异吸附的问题，具体的情况楼主需要进行单一变量空包对照分析。即按照ELISA的流程，分别把其中反应的一个试剂用稀释液代替，看是否有非特异吸附。如空白，抗原，酶联抗体，显色液；包被抗体，空白,酶联抗体，显色液；包被抗体，抗原,空白，显色液。确认是否信号为非特异性的。 问题2：未结合的抗原被洗掉这个绝对有放入，这也是ELISA定量时要有对照品，制作标准曲线的原因。因为对照品中相同浓度下的抗原中结合的抗原也会被洗掉，具有相同的反应过程，所以不会对定量产生影响。 关于ELISA，建议你多看看文献，如中国药典2015版9012等，知道ELISA定量是否准确的标准 |
6楼2016-12-22 16:36:15
