应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 有关间接竞争ELISA及标品稀释问题
31/1返回列表
查看: 1054  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

seven拂晓

新虫 (初入文坛)

[求助] 有关间接竞争ELISA及标品稀释问题 已有2人参与

各位高手，本人研一，做的是基因工程抗体，最后一步要利用间接竞争ELISA测抑制率。我以前从没接触过ELISA，所以实验中遇到了很多问题，恳请高手们耐心解答哈
      我的标品是氰戊菊酯，是把氰戊菊酯溶于甲醇，配成1000ppm的。试验时，用PBS稀释成10ppm，1ppm，0.1ppm。空白对照是把标品换成PBS。
      昨天，大老板莅临指导，说这样做有问题。第一，对照组里没有甲醇，这样会不会对试验结果又影响？第二，氰戊菊酯在水中的溶解度非常低（小于10μg/L),我在稀释过程中可能会有一部分氰戊菊酯析出，导致实际加入标品的量偏小。
      这两个问题，大家能不能帮我解答一下，并帮我想想解决方法。
     我做的间接竞争ELISA步骤如下：
  1.包板过夜
2.乳粉封闭
3.加标品及样品（样品就是我做的基因工程抗体）（空白对照是加PBS及样品）
4.加二抗
5.显色
6.终止
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-02-19 23:41:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
seven拂晓: 金币+5, ★有帮助 2014-02-25 12:56:04
个人感觉
第一，没有甲醇肯定不行，对照组一定要跟样品组只差一个成分
第二，析出问题，既然都选择用甲醇溶解了，就不是问题了吧
欢迎楼下大神
赞一下 回复此楼
天行健
2楼2014-02-20 15:08:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaxzhp

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
seven拂晓: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2014-03-13 11:44:01
1、你用PBS在稀释标准品的时候稀释倍数比较大，所以配制的标准品梯度里面含有的甲醇醇量是比较小的，这点微量的甲醇量在Elisa中没有太大影响。
2、药物在水中溶解度小，虽说高浓度是已经用甲醇溶解了的，但是不排除在用PBS梯度稀释的时候其溶解度发生改变的情况而导致药物析出（这个我曾经遇到过此类现象）
建议你在做标准品稀释的时候，在PBS中加上10~20%的甲醇，此浓度的甲醇量对你的Elisa检测影响不是特别大。
赞一下 回复此楼
3楼2014-03-12 15:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 seven拂晓 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +7 Doleres 2026-03-19 7/350 2026-03-20 10:39 by EBSD
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +20 rare12345 2026-03-18 20/1000 2026-03-20 08:42 by 无际的草原
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 307求调剂 +9 冷笙123 2026-03-17 9/450 2026-03-19 22:44 by 学员8dgXkO
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +14 陌の森林 2026-03-18 14/700 2026-03-19 22:38 by 学员8dgXkO
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 6/300 2026-03-19 17:18 by fei626-918
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +3 llllkkkhh 2026-03-18 3/150 2026-03-19 14:22 by houyaoxu
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 3/150 2026-03-19 13:36 by houyaoxu
[教师之家] 焦虑 +9 水冰月月野兔 2026-03-13 13/650 2026-03-19 09:50 by otani
[考研] 0703化学求调剂 总分331 +3 ZY-05 2026-03-13 3/150 2026-03-18 10:58 by macy2011
[考研] 生物学071000 329分求调剂 +3 我爱生物生物爱� 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:12 by macy2011
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 考研化学学硕调剂，一志愿985 +4 张vvvv 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:15 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 283求调剂 +3 听风就是雨； 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:41 by 热情沙漠
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
[考研] 304求调剂 +4 ahbd 2026-03-14 4/200 2026-03-16 16:48 by 我的船我的海
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭