应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » 有关间接竞争ELISA及标品稀释问题
31/1返回列表
查看: 1040  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

seven拂晓

新虫 (初入文坛)

[求助] 有关间接竞争ELISA及标品稀释问题 已有2人参与

各位高手，本人研一，做的是基因工程抗体，最后一步要利用间接竞争ELISA测抑制率。我以前从没接触过ELISA，所以实验中遇到了很多问题，恳请高手们耐心解答哈
      我的标品是氰戊菊酯，是把氰戊菊酯溶于甲醇，配成1000ppm的。试验时，用PBS稀释成10ppm，1ppm，0.1ppm。空白对照是把标品换成PBS。
      昨天，大老板莅临指导，说这样做有问题。第一，对照组里没有甲醇，这样会不会对试验结果又影响？第二，氰戊菊酯在水中的溶解度非常低（小于10μg/L),我在稀释过程中可能会有一部分氰戊菊酯析出，导致实际加入标品的量偏小。
      这两个问题，大家能不能帮我解答一下，并帮我想想解决方法。
     我做的间接竞争ELISA步骤如下：
  1.包板过夜
2.乳粉封闭
3.加标品及样品（样品就是我做的基因工程抗体）（空白对照是加PBS及样品）
4.加二抗
5.显色
6.终止
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-02-19 23:41:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
seven拂晓: 金币+5, ★有帮助 2014-02-25 12:56:04
个人感觉
第一，没有甲醇肯定不行，对照组一定要跟样品组只差一个成分
第二，析出问题，既然都选择用甲醇溶解了，就不是问题了吧
欢迎楼下大神
赞一下 回复此楼
天行健
2楼2014-02-20 15:08:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaxzhp

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
seven拂晓: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2014-03-13 11:44:01
1、你用PBS在稀释标准品的时候稀释倍数比较大，所以配制的标准品梯度里面含有的甲醇醇量是比较小的，这点微量的甲醇量在Elisa中没有太大影响。
2、药物在水中溶解度小，虽说高浓度是已经用甲醇溶解了的，但是不排除在用PBS梯度稀释的时候其溶解度发生改变的情况而导致药物析出（这个我曾经遇到过此类现象）
建议你在做标准品稀释的时候，在PBS中加上10~20%的甲醇，此浓度的甲醇量对你的Elisa检测影响不是特别大。
赞一下 回复此楼
3楼2014-03-12 15:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 seven拂晓 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 情人节自我反思：在爱情中有过遗憾吗？ +5 瞬息宇宙 2026-02-15 6/300 2026-02-18 12:51 by 月下雪林
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:38 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:38 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:08 by lotyj5cz79
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 3/150 2026-02-18 06:53 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错，点赞！ +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题，请指教！ 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭