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有关间接竞争ELISA及标品稀释问题 已有2人参与
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各位高手，本人研一，做的是基因工程抗体，最后一步要利用间接竞争ELISA测抑制率。我以前从没接触过ELISA，所以实验中遇到了很多问题，恳请高手们耐心解答哈 我的标品是氰戊菊酯，是把氰戊菊酯溶于甲醇，配成1000ppm的。试验时，用PBS稀释成10ppm，1ppm，0.1ppm。空白对照是把标品换成PBS。 昨天，大老板莅临指导，说这样做有问题。第一，对照组里没有甲醇，这样会不会对试验结果又影响？第二，氰戊菊酯在水中的溶解度非常低（小于10μg/L),我在稀释过程中可能会有一部分氰戊菊酯析出，导致实际加入标品的量偏小。 这两个问题，大家能不能帮我解答一下，并帮我想想解决方法。 我做的间接竞争ELISA步骤如下： 1.包板过夜 2.乳粉封闭 3.加标品及样品（样品就是我做的基因工程抗体）（空白对照是加PBS及样品） 4.加二抗 5.显色 6.终止 |
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youlinglyw
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