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[求助]
ELISA遇到问题，向各位大侠请教
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各位大侠，小女子目前正在建立紫杉醇的ELISA检测试剂盒。购买了abcam的anti-taxol antibody，外包做紫杉醇-BSA偶联（具体偶联方法不清）。 用了两种方式做紫杉醇检测： 一是紫杉醇偶联BSA后，包被、封闭，加入HRP标记的紫杉醇抗体（稀释倍数仅为200-300倍），加底物进行显色； 二是包被紫杉醇抗体，封闭，加HRP标记的紫杉醇，加底物进行显色； 两种试验测试的吸光度值均很低，且增大抗体或紫杉醇浓度后，吸光度值无明显变化。 推测要么是抗体质量有问题，要么是我们的紫杉醇与BSA的偶联方式影响了亲和位点，导致抗体与紫杉醇亲和力下降。但是具体怎么分析问题的原因，又该采取什么方式进行改进呢？望各位大侠指点，不胜感激。 |
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