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ELISA遇到问题,向各位大侠请教
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各位大侠,小女子目前正在建立紫杉醇的ELISA检测试剂盒。购买了abcam的anti-taxol antibody,外包做紫杉醇-BSA偶联(具体偶联方法不清)。 用了两种方式做紫杉醇检测: 一是紫杉醇偶联BSA后,包被、封闭,加入HRP标记的紫杉醇抗体(稀释倍数仅为200-300倍),加底物进行显色; 二是包被紫杉醇抗体,封闭,加HRP标记的紫杉醇,加底物进行显色; 两种试验测试的吸光度值均很低,且增大抗体或紫杉醇浓度后,吸光度值无明显变化。 推测要么是抗体质量有问题,要么是我们的紫杉醇与BSA的偶联方式影响了亲和位点,导致抗体与紫杉醇亲和力下降。但是具体怎么分析问题的原因,又该采取什么方式进行改进呢?望各位大侠指点,不胜感激。 |
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xuexue1204
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kunqian11