| 查看: 1455 | 回复: 14 | |||
wenyi2015银虫 (正式写手)
|
[交流]
重组蛋白 离子交换 已有7人参与
|
||
|
各位亲 本人纯化小白 最近做离子交换 目的蛋白大肠杆菌表达 pi 6.5 （网上计算值）使用20mm tris8.0 缓冲液上Q柱 目的蛋白几乎都流穿 目前可以过载 请给位帮助分析原因 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
寻找调剂
已经有7人回复
-
环境专硕324分求调剂推荐
已经有4人回复
-
291 求调剂
已经有8人回复
-
化学工程085602 305分求调剂
已经有11人回复
-
材料学硕297已过四六级求调剂推荐
已经有12人回复
-
一志愿北京化工大学材料与化工 264分各科过A区国家线
已经有6人回复
-
085600 材料与化工 329分求调剂
已经有9人回复
-
一志愿厦门大学化学学硕307求调剂
已经有3人回复
-
315分求调剂
已经有4人回复
-
化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白质的性质
已经有9人回复
- DEAE离子交换层析
已经有2人回复
- 招聘分子克隆专员和蛋白质纯化专员
已经有10人回复
- 如何鉴定蛋白质的纯度
已经有10人回复
- 请大家帮忙分析蛋白纯化的结果
已经有23人回复
- 蛋白质生物化学与生物技术
已经有189人回复
- 【资料】GE公司 经典纯化手册中文版 全套十本PDF
已经有680人回复
- DEAE纯化重组蛋白无法完全洗脱下来。
已经有0人回复
- 提供重组蛋白的表达与精细纯化服务
已经有1人回复
- 蛋白质纯化与鉴定实验指南[l冷泉港]中译本
已经有661人回复
- 【分享】蛋白质纯化个人总结2
已经有38人回复
- 【资料】续：众多生物信息学数据库，总有你需要的，
已经有23人回复
chlorella409
木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 88 (初中生)
- 金币: 3245.6
- 散金: 1000
- 红花: 4
- 帖子: 376
- 在线: 182.4小时
- 虫号: 1600249
- 注册: 2012-02-05
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
4楼2016-06-30 09:59:48
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
| 蛋白都流穿了，原因主要是缓冲液pH，超声功率（前提是包涵体哈），标签丢失，未暴露等原因，详细解决方案可见：蛋白纯化常见问题分析解决：http://www.detaibio.com/topics/qin-he-chun-hua-faq.html |
6楼2016-07-01 18:06:30
8楼2016-07-02 19:00:53
木槿飘扬
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2927.4
- 红花: 4
- 帖子: 148
- 在线: 48.8小时
- 虫号: 1765280
- 注册: 2012-04-19
- 专业: 生物化工与食品化工
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
1不是这种变化影响蛋白挂柱的。pH的变化可能是温度变化引起的，而且正常缓冲液配了保存pH都会变化的。还有，看介质说明书上有没有说这种缓冲体系的离子和介质发生相互作用呢。2算过收率吗？不跑电泳问怎么确定穿透有你的蛋白呢。3挂不上就优化条件嘛。如pH 发自小木虫Android客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
9楼2016-07-03 08:01:01
hc-material
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +702 - BioEPI: 1
- 应助: 517 (博士)
- 金币: 462.9
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.8小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
- 性别: GG
- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
2楼2016-06-29 17:56:53
wenyi2015
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1935.2
- 散金: 50
- 帖子: 629
- 在线: 14.5小时
- 虫号: 4805115
- 注册: 2016-06-29
- 性别: MM
- 专业: 抗体工程学
3楼2016-06-29 17:58:36
wenyi2015
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1935.2
- 散金: 50
- 帖子: 629
- 在线: 14.5小时
- 虫号: 4805115
- 注册: 2016-06-29
- 性别: MM
- 专业: 抗体工程学
5楼2016-06-30 15:17:05
wenyi2015
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1935.2
- 散金: 50
- 帖子: 629
- 在线: 14.5小时
- 虫号: 4805115
- 注册: 2016-06-29
- 性别: MM
- 专业: 抗体工程学
7楼2016-07-02 09:03:48
wenyi2015
银虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1935.2
- 散金: 50
- 帖子: 629
- 在线: 14.5小时
- 虫号: 4805115
- 注册: 2016-06-29
- 性别: MM
- 专业: 抗体工程学
送红花一朵 |
多谢指导 我的确没有跑胶 用的是elisa检查目标蛋白 流穿组分活性很高 梯度洗脱各个组分400mm nacl浓度洗脱有较弱活性 其他都无活性 柱体积15-20ml 上样体积10ml 蛋白浓度<1mg /ml 发自小木虫IOS客户端 |
10楼2016-07-04 08:21:21
